公开(公告)号：CN105950571B

公开(公告)日：2019-08-23

申请号：CN201610536389.0

申请日：2016-07-08

申请人： 武汉市农业科学院

发明人： 周伟东 ,  邓平 ,  喻运珍 ,  喻婷 ,  张立强 ,  周勇 ,  徐洪亮 ,  艾桃山 ,  林蠡 ,  周裕和

IPC分类号： C12N7/00 ,  C12R1/93

摘要： 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种基于鲤鱼上皮瘤细胞EPC的鳜鱼传染性脾肾坏死病毒ISKNV的增殖方法。所述增殖方法为：培养EPC细胞系；用ISKNV感染EPC细胞，恒温培养后收集培养液上清；再用培养液上清中的ISKNV感染EPC细胞，重复操作2～3次，ISKNV毒种复壮后，取培养液上清液氮保存，作为ISKNV扩增毒种；用复壮后的ISKNV毒种感染EPC细胞，恒温培养至CPE>80％，收集上清液，获得ISKNV病毒粒子。本发明以EPC细胞系作为ISKNV感染的敏感细胞，EPC细胞系商品化程度高，易于获得，容易培养，并且和鳜鱼的亲缘关系较远，可大大降低ISKNV用于灭活疫苗时的纯化难度，减少不良反应。