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公开(公告)号：CN119799782A
公开(公告)日：2025-04-11
申请号：CN202411967918.3
申请日：2024-12-30
Applicant: 武汉大学中南医院
IPC: C12N15/85 , C12N15/113 , C12N9/22
Abstract: 本发明公开了一种基于sgRNA的修饰调控基因编辑的方法，所述方法包括：在sgRNA的2'‑OH位点进行POC酰化修饰以引入炔基标记，获得带有炔基的sgRNA；将所述带有炔基的sgRNA与叠氮化物在铜催化试剂下发生铜催化的叠氮‑炔基环加成反应形成稳定的化学交联结构，从而实现对sgRNA活性的快速关闭调节。该方法通过在sgRNA上引入炔基并与多叠氮化物进行CuAAC反应，形成稳定的交联，从而实现CRISPR‑Cas9系统活性的精确控制。这种创新方法不仅能在不破坏RNA的原有结构和功能的基础上，有效控制基因编辑活性，还能显著提高CRISPR系统的目标特异性，降低由非特异性切割引起的基因组损伤风险。
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