公开(公告)号：CN101386893B

公开(公告)日：2011-07-27

申请号：CN200810197411.9

申请日：2008-10-28

申请人： 武汉大学

发明人： 郑从义 ,  黄璇 ,  李勇 ,  屈三甫

IPC分类号： C12Q1/70 ,  C12Q1/68

摘要： 本发明公开了一种检测口蹄疫病毒基因组RNA的单细胞实时荧光定量RT-PCR方法。该方法利用显微注射仪分离感染口蹄疫病毒的单个细胞，裂解后即用荧光定量RT-PCR进行定量分析。显微注射仪的可视化操作能快速准确地分离单个细胞，与高灵敏度的荧光定量RT-PCR相结合可实现检测单个细胞内病毒基因组RNA的量。该方法可用于在单细胞水平上研究病毒的复制及其与宿主细胞的关系，为病毒感染细胞生物学的深入研究提供一种新的方法。且分离与裂解细胞的技术具有广泛适用性，可直接应用于其它种类病毒感染的细胞或正常细胞的分离预处理，使得本发明的方法也能用于其它RNA病毒基因组检测和正常细胞基因组复制及转录的分子机制研究。

公开(公告)号：CN101386893A

公开(公告)日：2009-03-18

申请号：CN200810197411.9

申请日：2008-10-28

申请人： 武汉大学

发明人： 郑从义 ,  黄璇 ,  李勇 ,  屈三甫

IPC分类号： C12Q1/70 ,  C12Q1/68

摘要： 本发明公开了一种检测口蹄疫病毒基因组RNA的单细胞实时荧光定量RT－PCR方法。该方法利用显微注射仪分离感染口蹄疫病毒的单个细胞，裂解后即用荧光定量RT－PCR进行定量分析。显微注射仪的可视化操作能快速准确地分离单个细胞，与高灵敏度的荧光定量RT－PCR相结合可实现检测单个细胞内病毒基因组RNA的量。该方法可用于在单细胞水平上研究病毒的复制及其与宿主细胞的关系，为病毒感染细胞生物学的深入研究提供一种新的方法。且分离与裂解细胞的技术具有广泛适用性，可直接应用于其它种类病毒感染的细胞或正常细胞的分离预处理，使得本发明的方法也能用于其它RNA病毒基因组检测和正常细胞基因组复制及转录的分子机制研究。