一种分离外被体蛋白I包被囊泡的方法

    公开(公告)号:CN118652835A

    公开(公告)日:2024-09-17

    申请号:CN202410958802.7

    申请日:2024-07-17

    Inventor: 扆妍妍 张亮

    Abstract: 本发明公开了一种分离外被体蛋白I包被囊泡的方法,具体包括以下步骤:先将细胞消化后接种于细胞培养瓶中,清洗,加入等渗液,离心,加入等渗液,依次通过21号针头和27号针头,三次离心,离心浓缩,得到细胞裂解浓缩液;然后将ProteinA/G免疫磁珠在磁力架上静置,加入等渗液,静置,加入等渗液稀释的Anti‑COPα抗体,涡旋混匀,孵育,静置,加入等渗液,洗涤,加入细胞裂解浓缩液,孵育,静置,加入等渗液,洗涤;最后加入重组COPα蛋白溶液,孵育,静置,收取囊泡洗脱液,即得。本发明获得了保持原有特征和功能的内源性外被体蛋白I包被囊泡,有利于在真实的细胞环境下对其物质转运功能和转运成分进行研究、鉴定。

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