公开(公告)号：CN112760335A

公开(公告)日：2021-05-07

申请号：CN202110112338.6

申请日：2021-01-27

Applicant: 新疆农业科学院植物保护研究所

Inventor： 付开赟 ,  丁新华 ,  郭文超 ,  王小武 ,  吐尔逊·阿合买提 ,  付文君 ,  班小莉 ,  常瑞 ,  刘文 ,  张仁福

IPC: C12N15/70 ,  C12N15/67 ,  C12N15/66

Abstract: 筛选菌液表达dsRNA载体的方法，它涉及一种筛选表达dsRNA载体的方法。针对RNAi的特异性以及原核发酵获得dsRNA良好的应用前景，本发明提供筛选菌液表达dsRNA载体的方法以及提高原核表达dsRNA表达量的方法。本发明方法：一、合成测试dsgfp片段；二、设计引物；三、测试dsgfp片段扩增；四、备选表达载体酶切后与扩增片段重组，质粒转入感受态细胞；五、IPTG诱导表达；六、体外合成的dsgfp DNA模板制备；七、取诱导菌液用备选dsRNA提取方法提取菌液中的dsgfp；八、根据测定结果从备选表达载体中确定最合适的表达载体及最佳dsRNA提取方法。