公开(公告)号：CN115044571B

公开(公告)日：2023-11-24

申请号：CN202210709994.9

申请日：2022-06-22

Applicant: 扬州大学广陵学院

Inventor： 张立奎 ,  殷有成 ,  李铮 ,  姜董豪

IPC: C12N9/24 ,  C12N15/56 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12Q1/34 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种极端嗜热古菌Sulfolobus islandicus REY15A重组HhH‑GPD(Sis‑HhH‑GPD)蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明利用基因工程技术，构建了一株表达Sis‑HhH‑GPD蛋白的基因工程菌，该基因工程菌能够高效地表达Sis‑HhH‑GPD蛋白，且后续的纯化步骤简单易行，很容易得到大量重组酶蛋白。该重组Sis‑HhH‑GPD蛋白能够特异性切除DNA中的1‑meA，并且结合含有1‑meA DNA的能力显著地高于结合正常的DNA。本发明所涉及的重组Sis‑HhH‑GPD蛋白作为DNA甲基化的检测试剂，在医疗领域和分子生物学领域具有广泛的应用前景。(56)对比文件Likui Zhang等.Biochemicalcharacterization and mutational studiesof a thermostable endonuclease III fromSulfolobus islandicus REY15A.Int J BiolMacromol.2021,第193卷全文.

公开(公告)号：CN115044571A

公开(公告)日：2022-09-13

申请号：CN202210709994.9

申请日：2022-06-22

Applicant: 扬州大学广陵学院

Inventor： 张立奎 ,  殷有成 ,  李铮 ,  姜董豪

IPC: C12N9/24 ,  C12N15/56 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12Q1/34 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种极端嗜热古菌Sulfolobus islandicus REY15A重组HhH‑GPD(Sis‑HhH‑GPD)蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明利用基因工程技术，构建了一株表达Sis‑HhH‑GPD蛋白的基因工程菌，该基因工程菌能够高效地表达Sis‑HhH‑GPD蛋白，且后续的纯化步骤简单易行，很容易得到大量重组酶蛋白。该重组Sis‑HhH‑GPD蛋白能够特异性切除DNA中的1‑meA，并且结合含有1‑meA DNA的能力显著地高于结合正常的DNA。本发明所涉及的重组Sis‑HhH‑GPD蛋白作为DNA甲基化的检测试剂，在医疗领域和分子生物学领域具有广泛的应用前景。