一种强活性的水稻启动子序列及验证方法

    公开(公告)号:CN114292845B

    公开(公告)日:2024-02-23

    申请号:CN202111628276.0

    申请日:2021-12-28

    Applicant: 扬州大学

    Inventor: 刘鹏 张韬

    Abstract: 本发明公开了一种强活性的水稻启动子序列及验证方法,基因序列如SEQ ID NO.1。方法包括:(1)OsUBQ启动子序列扩增,构建OsUBQ驱动GFP的表达载体;(2)Ubi1启动子序列扩增,构建由Ubi1驱动的GFP表达载体;(3)使用CaMV35S启动子为正对照;(4)水稻原生质体制备与转化;子CaMV35S、OsUBQ和Ubi1活性。本发明的水稻启动子序列,本质是DNA分子,1405bp,能够启动基因的表达并且活性更强。(5)在瞬时表达系统通过荧光强度评估三个启动

    一种有活性的落叶松增强子、获取及鉴定方法

    公开(公告)号:CN112553198B

    公开(公告)日:2022-06-14

    申请号:CN202011333005.8

    申请日:2020-11-24

    Applicant: 扬州大学

    Inventor: 张韬 刘鹏 刘冠卿

    Abstract: 本发明公开了一种有活性的落叶松增强子、获取及鉴定方法。增强子DNA序列如SEQ ID NO.1。用特异引物以日本落叶松的基因组DNA为模板,扩增得到560bp的扩增产物,即得。根据增强子可远距离促进转录的特征,mini35s启动子单独不能启动的报告基因GFP表达,当该载体中连入有功能的增强子后,其可以促进荧光蛋白转录,从而观察到荧光,以验证。本发明提供的落叶松增强子序列,本质是DNA分子,560bp,能够促进转录。

    一种快速鉴定水稻双向启动子的方法

    公开(公告)号:CN111394385A

    公开(公告)日:2020-07-10

    申请号:CN202010234073.2

    申请日:2020-03-30

    Applicant: 扬州大学

    Inventor: 刘鹏 李鑫琪 张韬

    Abstract: 本发明公开了一种快速鉴定水稻双向启动子的方法,该方法将双向启动子OsBDP1和OsBDP2两端分别连接两个不同的荧光蛋白GFP和RFP,在原生质体转化后观察两侧的荧光信号来检测其活性。该鉴定方法一方面利用瞬时转化缩短了实验时间,另一方面通过同时检测两侧荧光蛋白活性而减少了工作量,为快速鉴定水稻中的双向启动子提供了一个高效途径。

    一种内含子DNA及在增强基因表达能力中应用

    公开(公告)号:CN117511943A

    公开(公告)日:2024-02-06

    申请号:CN202311478667.8

    申请日:2023-11-08

    Applicant: 扬州大学

    Inventor: 刘鹏 张韬

    Abstract: 本发明公开了一种内含子DNA及其在增强基因表达能力中的应用。内含子DNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。SUI1(LOC_Os07g34589)基因的启动子能启动报告GFP基因表达,当启动子和5’UTR区的内含子共同存在时,GFP表达上升,荧光信号显著增强,说明1049bp内含子能显著促进基因表达。本发明确定了SUI1基因5’UTR区的1049bp内含子序列,并在瞬时转化体系中,验证了该内含子增强基因表达的功能。

    一种水稻增强子及鉴定方法

    公开(公告)号:CN111549026B

    公开(公告)日:2023-02-28

    申请号:CN202010309791.1

    申请日:2020-04-17

    Applicant: 扬州大学

    Inventor: 张韬 马佳琦 刘鹏

    Abstract: 本发明公开了一种水稻增强子及鉴定方法。该水稻增强子为622bp的DNA分子,序列如SEQ ID NO.1。构建OsENHANCER1 reporter载体、正对照载体CaMV35S‑GFP reporter(SEQ ID NO.2)和负对照载体Enhancerless reporter(SEQ ID NO.3),通过水稻原生质体转化进行鉴定。本发明增强子在基因转录过程中发挥重要作用,鉴定方法快速,便捷。

    一种具有增强子功能的落叶松DNA分子、获取及鉴定方法

    公开(公告)号:CN112522265B

    公开(公告)日:2022-06-14

    申请号:CN202011333330.4

    申请日:2020-11-24

    Applicant: 扬州大学

    Inventor: 刘鹏 张韬 刘冠卿

    Abstract: 本发明公开了一种具有增强子功能的落叶松DNA分子、获取及鉴定方法。增强子DNA序列如SEQ ID NO.1。用特异引物以日本落叶松的基因组DNA为模板,扩增得到574bp的扩增产物,即得。mini35s启动子单独不能启动的报告基因GFP表达,由于增强子可远距离促进转录的特征,当有功能的增强子插入该载体中后,其可以促进荧光蛋白转录,从而观察到荧光。本发明提供的落叶松增强子序列,本质是DNA分子,574bp,能够促进转录。

    一种具有启动子功能的落叶松DNA分子、获取及鉴定方法

    公开(公告)号:CN112481260B

    公开(公告)日:2022-06-14

    申请号:CN202011332979.4

    申请日:2020-11-24

    Applicant: 扬州大学

    Inventor: 刘鹏 张韬 刘冠卿

    Abstract: 本发明公开了一种具有启动子功能的落叶松DNA分子、获取及鉴定方法。启动子DNA序列如SEQ ID NO.1。用特异引物以日本落叶松(Larix kaempferi)的基因组DNA为模板,扩增得到1179bp的扩增产物,即得。将该段DNA分子启动GFP荧光蛋白基因表达,在荧光显微镜下可观察到荧光,证实该序列有功能,反之,则不能。本发明提供的落叶松启动子序列,本质是DNA分子,1179bp,能够启动转录。

    一种强活性的水稻启动子序列及验证方法

    公开(公告)号:CN114292845A

    公开(公告)日:2022-04-08

    申请号:CN202111628276.0

    申请日:2021-12-28

    Applicant: 扬州大学

    Inventor: 刘鹏 张韬

    Abstract: 本发明公开了一种强活性的水稻启动子序列及验证方法,基因序列如SEQ ID NO.1。方法包括:(1)OsUBQ启动子序列扩增,构建OsUBQ驱动GFP的表达载体;(2)Ubi1启动子序列扩增,构建由Ubi1驱动的GFP表达载体;(3)使用CaMV35S启动子为正对照;(4)水稻原生质体制备与转化;(5)在瞬时表达系统通过荧光强度评估三个启动子CaMV35S、OsUBQ和Ubi1活性。本发明的水稻启动子序列,本质是DNA分子,1405bp,能够启动基因的表达并且活性更强。

    一种水稻内含子及其活性鉴定方法

    公开(公告)号:CN113736781A

    公开(公告)日:2021-12-03

    申请号:CN202110853869.0

    申请日:2021-07-27

    Applicant: 扬州大学

    Inventor: 刘鹏 张韬

    Abstract: 本发明公开了一种水稻内含子及其活性鉴定方法,水稻内含子的序列如SEQ ID NO.1,通过构建Pro::GFP、Pro+Intron+UTR::GFP、Pro+UTR::GFP三个载体来鉴定内含子的活性,结果显示,本发明的内含子DNA分子,104bp,对转录具有较好的增强效果。

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