公开(公告)号：CN103468654A

公开(公告)日：2013-12-25

申请号：CN201310264620.1

申请日：2013-06-28

Applicant: 徐州工程学院

Inventor： 李文 ,  王陶 ,  何广会

IPC: C12N9/02 ,  C12R1/02

Abstract: 一种溶菌酶—曲拉通联合破碎醋酸杆菌提取乙醛脱氢酶的方法，属于从菌体细胞中提取乙醛脱氢酶的方法。利用溶菌酶和曲拉通联合破碎细胞的方法，先用溶菌酶破坏菌体的细胞壁，再采用曲拉通把乙醛脱氢酶从膜上解离下来，高效破碎细胞、较好地保持乙醛脱氢酶活性；取醋酸杆菌湿菌体，加入含溶菌酶的Tris-HCl缓冲溶液，37℃保温；再加入曲拉通X-100溶液，摇匀，置室温下反应，收集上清液，即得乙醛脱氢酶粗酶液。此法工艺简单，条件温和，不需特殊的仪器设备，不仅可以很好地破碎细胞，分离膜结合酶，而且还可使乙醛脱氢酶保持较高的活性，具有广阔的推广应用前景。

公开(公告)号：CN105166942A

公开(公告)日：2015-12-23

申请号：CN201510647507.0

申请日：2015-10-09

Applicant: 徐州工程学院

Inventor： 王陶 ,  李文 ,  何广会 ,  刘恩岐 ,  董玉玮 ,  张传丽

IPC: A23L1/308 ,  A23L1/238 ,  A23L1/025 ,  A23L1/01

CPC classification number: A23V2002/00 ,  A23V2250/5116 ,  A23V2300/48

Abstract: 本发明提供了一种酶法辅助微波-超声波协同提取酱油渣中可溶性膳食纤维的方法，采用酱油渣为主要原料，将新鲜酱油渣60℃恒温干燥，粉碎过60目筛，石油醚脱脂后，加入纯水，放于微波-超声波协同萃取仪中，调节pH4.5，间歇萃取时间为500s；再加入木瓜蛋白酶，进行酶解，并加热灭酶活后，再加入纤维素酶，进行酶解，对酶解液抽滤，滤液旋转蒸发得浓缩液，加入95%乙醇进行醇沉，然后对沉淀进行低温冷冻干燥，制得可溶性膳食纤维。本发明提取工艺简单，集中了微波-超声波协同提取效率高、产品纯度高，可操作性强，同时结合了生物酶的高效活性等优点，提取时间短，具有广阔的推广应用前景。

公开(公告)号：CN103468654B

公开(公告)日：2015-05-13

申请号：CN201310264620.1

申请日：2013-06-28

Applicant: 徐州工程学院

Inventor： 李文 ,  王陶 ,  何广会

IPC: C12N9/02 ,  C12R1/02

Abstract: 一种溶菌酶—曲拉通联合破碎醋酸杆菌提取乙醛脱氢酶的方法，属于从菌体细胞中提取乙醛脱氢酶的方法。利用溶菌酶和曲拉通联合破碎细胞的方法，先用溶菌酶破坏菌体的细胞壁，再采用曲拉通把乙醛脱氢酶从膜上解离下来，高效破碎细胞、较好地保持乙醛脱氢酶活性；取醋酸杆菌湿菌体，加入含溶菌酶的Tris-HCl缓冲溶液，37℃保温；再加入曲拉通X-100溶液，摇匀，置室温下反应，收集上清液，即得乙醛脱氢酶粗酶液。此法工艺简单，条件温和，不需特殊的仪器设备，不仅可以很好地破碎细胞，分离膜结合酶，而且还可使乙醛脱氢酶保持较高的活性，具有广阔的推广应用前景。