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公开(公告)号：CN106987554A
公开(公告)日：2017-07-28
申请号：CN201710248949.7
申请日：2017-04-17
Applicant: 广东顺德工业设计研究院(广东顺德创新设计研究院)
Abstract: 本发明涉及一种悬浮细胞株及其驯化方法。该悬浮细胞株的驯化方法包括如下步骤：将贴壁型细胞在含9.5‑10.5％血清的培养基中复苏后，接种于含4.5％‑5.5％血清的培养基的方瓶中传代培养1‑3次，再将其从方瓶中依次转移接种到血清含量依次为3.0％‑3.6％、1.8‑2.2％及0.8‑1.2％的培养基的摇瓶中进行摇瓶悬浮培养1‑4代后，再转移至无血清培养基的摇瓶中传代培养1‑3次，即得。相对传统驯化方法，本发明的悬浮细胞株驯化方法在降血清含量的同时进行悬浮驯化培养，每个血清梯度对应的细胞传代次数保持在1‑3次即可，整体上控制贴壁型细胞的驯化周期在一个月内完成，显著缩短驯化周期，节省驯化成本。本发明的悬浮细胞株的驯化方法获得的悬浮细胞株的分散性好、活率高、生长速率高。
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公开(公告)号：CN106987554B
公开(公告)日：2020-05-05
申请号：CN201710248949.7
申请日：2017-04-17
Applicant: 广东顺德工业设计研究院(广东顺德创新设计研究院)
Abstract: 本发明涉及一种悬浮细胞株及其驯化方法。该悬浮细胞株的驯化方法包括如下步骤：将贴壁型细胞在含9.5‑10.5％血清的培养基中复苏后，接种于含4.5％‑5.5％血清的培养基的方瓶中传代培养1‑3次，再将其从方瓶中依次转移接种到血清含量依次为3.0％‑3.6％、1.8‑2.2％及0.8‑1.2％的培养基的摇瓶中进行摇瓶悬浮培养1‑4代后，再转移至无血清培养基的摇瓶中传代培养1‑3次，即得。相对传统驯化方法，本发明的悬浮细胞株驯化方法在降血清含量的同时进行悬浮驯化培养，每个血清梯度对应的细胞传代次数保持在1‑3次即可，整体上控制贴壁型细胞的驯化周期在一个月内完成，显著缩短驯化周期，节省驯化成本。本发明的悬浮细胞株的驯化方法获得的悬浮细胞株的分散性好、活率高、生长速率高。
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公开(公告)号：CN106939353A
公开(公告)日：2017-07-11
申请号：CN201710321501.3
申请日：2017-05-09
Applicant: 广东顺德工业设计研究院(广东顺德创新设计研究院)
CPC classification number: C12Q1/689 , C12Q1/686 , C12Q2545/113
Abstract: 本发明公开了一种用于检测支原体的PCR引物、阳性质粒及其构建方法、试剂盒及检测方法。本发明创造性地通过比较选择不同种别的支原体中所共有的保守序列进行PCR引物的设计选择，设计特异性的PCR引物用于扩增支原体16sRNA和23sRNA间的间隔区的一端基因片段，该基因片段涵盖多数的支原体种别，因而可以用于针对多种别的支原体进行PCR扩增检测。并且由于各种别间隔区基因结构不同，从而可以根据扩增产物的大小和酶切部位的不同，作为鉴别种别的根据，为支原体的种别鉴定提供了技术支持。该用于检测支原体的PCR引物、阳性质粒及其构建方法、试剂盒及检测方法灵敏度和检测准确性高，可广泛推广应用于支原体的检测。
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