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公开(公告)号:CN111040998B
公开(公告)日:2023-05-05
申请号:CN201911357734.4
申请日:2019-12-25
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
IPC: C12N5/10 , C12N15/85 , C12N15/90 , C12N15/47 , C12P21/02 , C07K14/145 , A61K39/205 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一种稳定表达狂犬病毒糖蛋白细胞株的构建及其应用,使用CRISPR‑Cas9技术将狂犬病毒糖蛋白基因定点敲入鼠源神经瘤母细胞(N2a cells)的Rosa26Safe‑harbor位点,经嘌呤霉素压力筛选和有限稀释法获得稳定表达狂犬病毒糖蛋白的细胞株,再逐步扩大培养,以实现狂犬病毒糖蛋白稳定高效表达,获得的蛋白纯度高、稳定性好。为疫苗研制和狂犬病致病机理研究提供平台,有利于狂犬病毒的疾病诊断和深层次的分子机制研究。
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公开(公告)号:CN108456692B
公开(公告)日:2022-06-14
申请号:CN201810086771.5
申请日:2018-01-30
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
IPC: C12N15/86 , C12N15/66 , A61K48/00 , A61K31/713 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一种抗口蹄疫病毒miRNA载体,载体上有针对FMDV 3C蛋白的3C1片段序列、3C2片段序列及针对FMDV 3D蛋白的3D1片段序列、3D2片段序列。该载体可以突破血清型的壁垒,解决传统疫苗免疫血清型不能交叉保护的问题;可有效的激活细胞免疫;而使用减毒鼠伤寒沙门氏菌作为疫苗活载体具有能够激发宿主产生针对其所携带外源抗原的特异性免疫应答,增强粘膜、细胞免疫的功能,制备简单,易于储存运输,抗原无需提纯、成本低廉等优点。
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公开(公告)号:CN114214268A
公开(公告)日:2022-03-22
申请号:CN202111517166.7
申请日:2021-12-13
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
IPC: C12N5/071 , C12N5/10 , C12N15/85 , C07K14/705
Abstract: 本发明属于基因重组与蛋白表达技术领域,具体涉及一种稳定表达SLAM蛋白的非洲绿猴肾细胞系及其构建方法和应用,本发明的细胞系为非洲绿猴肾细胞Vero‑E6‑SLAM,于2021年11月11日送往广东省微生物菌种保藏中心保藏,保藏编号为GDMCCNo:62054。通过构建pAAVS1‑Donor‑SLAM过表达质粒,再与pCas‑Guide‑AAVS1共转染至Vero‑E6细胞得到。该细胞系可以将外源基因整合入基因组内已知的安全位点,实现转入基因的正常表达而又不影响细胞的正常生理功能,克隆准确度高,可以应用于高产SLAM蛋白,为犬瘟热病毒的分离和致病机制研究提供平台。
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公开(公告)号:CN108456692A
公开(公告)日:2018-08-28
申请号:CN201810086771.5
申请日:2018-01-30
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
IPC: C12N15/86 , C12N15/66 , A61K48/00 , A61K31/713 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一种抗口蹄疫病毒miRNA载体,载体上有针对FMDV 3C蛋白的3C1片段序列、3C2片段序列及针对FMDV 3D蛋白的3D1片段序列、3D2片段序列。该载体可以突破血清型的壁垒,解决传统疫苗免疫血清型不能交叉保护的问题;可有效的激活细胞免疫;而使用减毒鼠伤寒沙门氏菌作为疫苗活载体具有能够激发宿主产生针对其所携带外源抗原的特异性免疫应答,增强粘膜、细胞免疫的功能,制备简单,易于储存运输,抗原无需提纯、成本低廉等优点。
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公开(公告)号:CN114250202A
公开(公告)日:2022-03-29
申请号:CN202111528039.7
申请日:2021-12-14
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
IPC: C12N5/10 , C12N15/85 , C12N15/113 , C12N15/11 , C12N15/12 , C12N15/55 , C12N15/90 , C12N7/00 , C07K14/705 , C12R1/91
Abstract: 本发明属于细胞重组与蛋白表达技术领域,具体涉及一种稳定表达CD163蛋白的猪肾细胞系及其构建方法和应用,本发明的猪肾细胞系PK15‑CD163于2021年11月11日送往广东省微生物菌种保藏中心保藏,保藏编号为GDMCC No:62053。本发明是通过将目的基因CD163导入到猪基因组的ROSA26安全位点,从而构建得到的,所得细胞系可以将外源基因整合入基因组内已知的安全位点,实现转入基因的正常表达而又不影响细胞的正常生理功能。其构建过程简单,可重复性好,效率高,克隆准确度高,能高效确保正确克隆的获取,可以为蓝耳病毒的分离及病毒与宿主的致病机制研究等提供参考。
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公开(公告)号:CN114107176A
公开(公告)日:2022-03-01
申请号:CN202111525599.7
申请日:2021-12-14
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
Abstract: 本发明属于细胞重组与蛋白表达技术领域,具体涉及一种稳定表达非洲猪瘟CD2v蛋白的CHO细胞系及其构建方法和应用,本发明公开了一种稳定表达非洲猪瘟CD2v蛋白的CHO细胞系,所述细胞系为中国仓鼠卵巢细胞CHO‑CD2v,于2021年11月11日送往广东省微生物菌种保藏中心保藏,保藏编号为GDMCC No:62052。本发明的细胞系是将外源基因CD2v整合入中国仓鼠基因组内已知的安全位点,从而实现转入基因的正常表达而又不影响细胞的正常生理功能,其构建过程简单,克隆准确度高。该细胞系可以用于高产CD2v蛋白,非洲猪瘟药效筛选、疫苗生产等方面,对于非洲猪瘟的诊断和疫苗生产具有非常重要的意义。
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公开(公告)号:CN103882106A
公开(公告)日:2014-06-25
申请号:CN201310554556.0
申请日:2013-11-08
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
Abstract: 本发明公开了一种细菌耐药基因NDM-1的PCR检测引物及包含此引物的检测试剂盒。为了调查养殖场中的耐药细菌是否携带NDM-1基因,设计基因NDM-1的特异性PCR引物,优化PCR反应体系和条件,获得敏感性、特异性、重复性较高的细菌耐药基因NDM-1的PCR检测方法,该检测方法能检出的最低基因组DNA浓度为9.18×10-7μg/μL。本发明方法可作为畜禽养殖过程中携带耐药基因NDM-1细菌的早期诊断、快速筛查以及流行病学评估等手段,并可在当前兽医临床耐药细菌的监控防控中得到应用。
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公开(公告)号:CN112514855A
公开(公告)日:2021-03-19
申请号:CN202011374480.X
申请日:2020-11-30
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
Abstract: 本发明提供了一种利用猪粪尿养殖黑水虻幼虫的方法,属于环境治理技术领域,包括以下步骤:1)将猪粪和猪尿混合,得到猪粪尿,将所述猪粪尿与黑水虻幼虫混合后在养虫盘中进行养殖;所述猪粪尿的质量与黑水虻幼虫的条数比为4~6mg:1条;2)第一天,在养虫盘的盘壁四周撒上防逃料,第二天至第六天每天添加步骤1)所述的猪粪尿,第七天对黑水虻幼虫和粪渣分离,收获黑水虻幼虫;第一天至第六天养殖过程中,控制猪粪尿的温度为25~35℃;在黑水虻幼虫的养殖过程中,控制黑水虻幼虫所处的湿度为60~85%。采用本发明提供的方法为黑水虻幼虫提供较佳的生长环境,充分利用消耗猪粪尿,实现有效和环保地处理猪粪尿。
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公开(公告)号:CN111040998A
公开(公告)日:2020-04-21
申请号:CN201911357734.4
申请日:2019-12-25
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
IPC: C12N5/10 , C12N15/85 , C12N15/90 , C12N15/47 , C12P21/02 , C07K14/145 , A61K39/205 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一种稳定表达狂犬病毒糖蛋白细胞株的构建及其应用,使用CRISPR-Cas9技术将狂犬病毒糖蛋白基因定点敲入鼠源神经瘤母细胞(N2a cells)的Rosa26Safe-harbor位点,经嘌呤霉素压力筛选和有限稀释法获得稳定表达狂犬病毒糖蛋白的细胞株,再逐步扩大培养,以实现狂犬病毒糖蛋白稳定高效表达,获得的蛋白纯度高、稳定性好。为疫苗研制和狂犬病致病机理研究提供平台,有利于狂犬病毒的疾病诊断和深层次的分子机制研究。
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公开(公告)号:CN109874756A
公开(公告)日:2019-06-14
申请号:CN201910323088.3
申请日:2019-04-22
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
IPC: A01K67/033
Abstract: 本发明提供了一种水虻科昆虫饲养盘及其应用,属于昆虫饲养设备技术领域。本发明提供的水虻科昆虫饲养盘,包括盘底和盘壁,所述盘底为正八边形,所述盘底与每个盘壁的内表面的夹角为110~130°。本发明提供的水虻科昆虫饲养盘不仅能够多层饲养,节省空间;而且能够有效减少昆虫堆积的高度,避免其逃逸,有效提高生产效率。
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