公开(公告)号：CN110628700A

公开(公告)日：2019-12-31

申请号：CN201910980656.7

申请日：2019-10-14

申请人： 广东省中医院(广州中医药大学第二附属医院、广州中医药大学第二临床医学院、广东省中医药科学院)

发明人： 秦笙 ,  徐宁 ,  陈富 ,  罗丽 ,  周强 ,  蓝锴 ,  罗强 ,  郑水兰 ,  柯培锋 ,  黄宪章

IPC分类号： C12N5/071 ,  C12N5/09 ,  C12Q1/02

摘要： 本发明公开了一种用于筛选细胞培养条件的标准方法，包括如下步骤：1)配制不同浓度的培养基，包括用无血清DMEM稀释的羊水培养基以及加了不同血清浓度的羊水培养基；2)采用步骤1)中两种羊水培养基接种相同浓度的细胞，连续观察2天以上，用显微镜拍照以及文字描述细胞状态；3)采用量化的评分标准对步骤2)所得细胞状态加以评分统计，将细胞的生长状态进行量化，比较细胞在不同培养基中生长状态质量的差异；4)根据步骤3)所得差异，得出培养基浓度、细胞浓度以及培养时间三者之间的最佳配比，即得。该标准方法评估结果更加可靠，可以减少病毒分离失败、避免延误临床诊治；可以满足不同细胞、不同时间的需要，减少试剂的浪费。

公开(公告)号：CN108552158A

公开(公告)日：2018-09-21

申请号：CN201810323244.1

申请日：2018-04-09

申请人： 广东省中医院(广州中医药大学第二附属医院、广州中医药大学第二临床医学院、广东省中医药科学院)

发明人： 秦笙 ,  郑水兰 ,  周强 ,  柯培锋 ,  陈茶 ,  蓝锴 ,  张文 ,  黄宪章

IPC分类号： A01N1/02

摘要： 本发明公开了一种贴壁细胞冻存液，包括DMSO、1，2-丙二醇、聚乙二醇、BSA和DMEM培养基；本发明还公开了一种贴壁细胞的冻存方法，包括步骤：向贴壁细胞加入所述冻存液，混匀后冻存；以及一种贴壁细胞的解冻方法，包括步骤：(1)取冻存的贴壁细胞，经水浴加热解冻；(2)除去步骤(1)所得贴壁细胞中的冻存液，并用PBS溶液清洗以去除贴壁细胞中残留的冻存液，即得解冻后的贴壁细胞。采用本发明的冻存液处理的贴壁细胞冻存后可在低温状态下长期保存，按需取用，仅通过简单的复苏程序(不超过10分钟)即可使用；细胞贴壁冻存后可直接进行低温运输，为无细胞培养条件的实验室提供方便、即时可用的细胞。

公开(公告)号：CN110628700B

公开(公告)日：2023-10-17

申请号：CN201910980656.7

申请日：2019-10-14

申请人： 广东省中医院(广州中医药大学第二附属医院、广州中医药大学第二临床医学院、广东省中医药科学院)

发明人： 秦笙 ,  徐宁 ,  陈富 ,  罗丽 ,  周强 ,  蓝锴 ,  罗强 ,  郑水兰 ,  柯培锋 ,  黄宪章

IPC分类号： C12N5/071 ,  C12N5/09 ,  C12Q1/02

摘要： 本发明公开了一种用于筛选细胞培养条件的标准方法，包括如下步骤：1)配制不同浓度的培养基，包括用无血清DMEM稀释的羊水培养基以及加了不同血清浓度的羊水培养基；2)采用步骤1)中两种羊水培养基接种相同浓度的细胞，连续观察2天以上，用显微镜拍照以及文字描述细胞状态；3)采用量化的评分标准对步骤2)所得细胞状态加以评分统计，将细胞的生长状态进行量化，比较细胞在不同培养基中生长状态质量的差异；4)根据步骤3)所得差异，得出培养基浓度、细胞浓度以及培养时间三者之间的最佳配比，即得。该标准方法评估结果更加可靠，可以减少病毒分离失败、避免延误临床诊治；可以满足不同细胞、不同时间的需要，减少试剂的浪费。