公开(公告)号：CN101413009B

公开(公告)日：2011-05-04

申请号：CN200810218533.1

申请日：2008-10-22

Applicant: 广东暨大基因药物工程研究中心有限公司 ,  广州暨南大学医药生物技术研究开发中心

Inventor： 黄亚东 ,  吴道贫 ,  胡宏伟 ,  苏志坚 ,  刘洁生 ,  曲红艳 ,  李江峰 ,  柯实

IPC: C12N15/62 ,  C12N15/70 ,  C07K19/00 ,  C07K14/575

Abstract: 本发明提供了一种改构的人淀粉样多肽突变体—普兰林肽(pramlintide)的制备方法。本制备方法利用氨基端带有6个组氨酸标记小分子泛素相关修饰因子成熟肽(SmallUbiquitin-related Modifier，SUMO)和普兰林肽基因的进行融合表达。另外，本发明中普兰林肽基因是根据大肠杆菌偏爱性密码子为依据的合成基因，重组菌在发酵表达过程后，通过过Ni2+柱进行纯化，纯化的蛋白通过蛋白酶剪切后再次Ni2+柱过收集流穿液的峰得到纯化的普兰林肽。

公开(公告)号：CN101413009A

公开(公告)日：2009-04-22

申请号：CN200810218533.1

申请日：2008-10-22

Applicant: 广东暨大基因药物工程研究中心有限公司 ,  广州暨南大学医药生物技术研究开发中心

Inventor： 黄亚东 ,  吴道贫 ,  胡宏伟 ,  苏志坚 ,  刘洁生 ,  曲红艳 ,  李江峰 ,  柯实

IPC: C12N15/62 ,  C12N15/70 ,  C07K19/00 ,  C07K14/575

Abstract: 本发明提供了一种改构的人淀粉样多肽突变体－普兰林肽(pramlintide)的制备方法。本制备方法利用氨基端带有6个组氨酸标记小分子泛素相关修饰因子成熟肽(Small Ubiquitin－related Modifier，SUMO)和普兰林肽基因的进行融合表达。另外，本发明中普兰林肽基因是根据大肠杆菌偏爱性密码子为依据的合成基因，重组菌在发酵表达过程后，通过过Ni2+柱进行纯化，纯化的蛋白通过蛋白酶剪切后再次Ni2+柱过收集流穿液的峰得到纯化的普兰林肽。

公开(公告)号：CN102053030A

公开(公告)日：2011-05-11

申请号：CN200910193628.7

申请日：2009-11-03

Applicant: 广东暨大基因药物工程研究中心有限公司

Inventor： 金利泰 ,  李校堃 ,  黄志锋 ,  冯治国 ,  胡宏伟 ,  熊盛

IPC: G01N1/30

Abstract: 本发明涉及一种电泳凝胶上的质谱兼容的蛋白质银染法，包括如下步骤：1)将蛋白质样品电泳后的凝胶置于固定液中固定，染色液染色；2)脱色液脱色，去离子水水洗，硝酸银溶液银染；3)去离子水水洗，显影剂显色，EDTA溶液终止。本发明所述的蛋白质银染法灵敏度高，较现有蛋白质银染法所需时间更短，质谱兼容性好，可适合应用于高通量蛋白质组学研究。本发明涉及蛋白质染色领域，具体的说，涉及一种电泳凝胶上质谱兼容的蛋白质银染方法。