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公开(公告)号：CN116064660B
公开(公告)日：2023-10-17
申请号：CN202211006887.6
申请日：2022-08-22
Applicant: 山西农业大学
Abstract: 本发明公开了一种绵羊诱导性多能干细胞的制备方法，其是通过构建携带包括绵羊源转录因子OCT4、SOX2、KLF4、c‑MYC四因子串联、以及绵羊源转录因子NANOG和LIN28两因子串联的piggyBac转座子质粒，电穿孔转染至绵羊胎儿成纤维细胞中；挑选形态类似胚胎干细胞的克隆，再筛选符合胚胎干细胞特性的细胞克隆进行传代培养、鉴定，得到绵羊诱导性多能干细胞。本发明首次使用绵羊自体转录因子制备绵羊诱导性多能干细胞，并优化了电穿孔条件，效率高、安全性强、分化潜能好，对探究绵羊体细胞重编程机制、干细胞定向分化机制、早期胚胎发育及细胞命运决定机制与制备克隆绵羊、特殊功能基因修饰绵羊和疾病模型等有着重大意义。
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公开(公告)号：CN116064660A
公开(公告)日：2023-05-05
申请号：CN202211006887.6
申请日：2022-08-22
Applicant: 山西农业大学
Abstract: 本发明公开了一种绵羊诱导性多能干细胞的制备方法，其是通过构建携带包括绵羊源转录因子OCT4、SOX2、KLF4、c‑MYC四因子串联、以及绵羊源转录因子NANOG和LIN28两因子串联的piggyBac转座子质粒，电穿孔转染至绵羊胎儿成纤维细胞中；挑选形态类似胚胎干细胞的克隆，再筛选符合胚胎干细胞特性的细胞克隆进行传代培养、鉴定，得到绵羊诱导性多能干细胞。本发明首次使用绵羊自体转录因子制备绵羊诱导性多能干细胞，并优化了电穿孔条件，效率高、安全性强、分化潜能好，对探究绵羊体细胞重编程机制、干细胞定向分化机制、早期胚胎发育及细胞命运决定机制与制备克隆绵羊、特殊功能基因修饰绵羊和疾病模型等有着重大意义。
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公开(公告)号：CN119286770A
公开(公告)日：2025-01-10
申请号：CN202411403705.8
申请日：2024-10-09
Applicant: 山西农业大学
Abstract: 本发明公开了一种绵羊iPSCs定向成肌分化的诱导方法及其应用，绵羊诱导性多能干细胞传代培养一天后，分别使用分化培养基Ⅰ、分化培养基Ⅱ、分化培养基Ⅲ、分化培养基Ⅳ进行四个阶段的诱导分化，最终定向诱导分化为成肌细胞并融合为肌管。本发明通过应用多种关键信号通路的小分子和/或生长因子，成功将单层贴壁的绵羊iPSCs逐步定向诱导分化为成肌细胞并融合为肌管，对探究绵羊胚胎发育早期肌源性细胞形成的机制、发掘对肌肉发育具有价值的分子育种标记、开展体外肌肉组织工程和研发培养肉等有着重大意义。
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公开(公告)号：CN118389596A
公开(公告)日：2024-07-26
申请号：CN202410507942.2
申请日：2024-04-25
Applicant: 山西农业大学
Abstract: 本发明公开了一种猫诱导性多能干细胞的制备方法，其是构建携带串联的猫源OCT4、SOX2、KLF4和c‑MYC四因子的piggyBac转座子质粒、携带串联的猫源或猪源NANOG和LIN28两因子的piggyBac转座子质粒和携带猴肾病毒SV40LT质粒的piggyBac转座子质粒，转染到猫胎儿成纤维细胞中；挑取类似胚胎干细胞形态的克隆样细胞，并通过鉴定筛选符合胚胎干细胞特性的细胞克隆进行传代培养，即得。本发明的猫诱导性多能干细胞的制备方法，安全性强、效率高、分化潜能好，不仅为研究猫科动物ESCs体外培养条件和iPSCs的建系奠定科学基础，还为进一步培育克隆猫和基因修饰猫以及研究相关疾病机制、筛选药物和再生修复奠定了科学基础。
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