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公开(公告)号:CN116952917A
公开(公告)日:2023-10-27
申请号:CN202310948779.9
申请日:2023-07-31
申请人: 山东大学第二医院
摘要: 本发明公开了一种D‑2‑羟基戊二酸浓度的测定方法及试剂盒,涉及酶法检测技术领域;所述测定方法为非疾病诊断治疗用途,以FAD依赖型D‑2‑羟基戊二酸脱氢酶、刃天青和PBS缓冲液体系作为工作液,实现对固体状组织切片中D‑2‑羟基戊二酸的检测;制作标准曲线时,采用向琼脂糖水溶液中加入不同浓度的D‑2‑羟基戊二酸制备标准品切片;本发明的D‑2‑羟基戊二酸浓度的测定方法及试剂盒,将组织样品经过简单处理后即可对其中的D‑2‑羟基戊二酸浓度进行检测,检测结果与质谱检测方法的结果一致,准确率高;检测标准品及制备样品切片需要20分钟,样品切片检测时间约为3分钟,计算出D‑2‑HG浓度大概需要2分钟,在准备好标准品曲线和样本切片后仅需要不到5分钟,大大缩短了检测时间,降低了检测成本。
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公开(公告)号:CN116497062A
公开(公告)日:2023-07-28
申请号:CN202310085103.1
申请日:2023-02-01
申请人: 山东大学第二医院
摘要: 本发明公开了一种D‑2‑羟基戊二酸诱导转基因表达的控制系统,涉及合成生物学,基因治疗和细胞免疫技术领域,所述控制系统的感应对象为D‑2‑羟基戊二酸,分为高浓度D‑2‑羟基戊二酸诱导转基因表达的控制系统HGind‑H和低浓度D‑2‑羟基戊二酸诱导转基因表达的控制系统HGind‑L;所述控制系统包括重组转录抑制子、D‑2‑羟基戊二酸诱导型启动子和待转录序列;本发明利用该系统控制响应肿瘤代谢物D‑2‑HG的诊断基因路线、自杀基因路线和免疫细胞治疗性基因路线,从而开发出以D‑2‑HG为关键信息的活细胞传感器、自杀基因治疗产品和细胞治疗产品。
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公开(公告)号:CN108507984A
公开(公告)日:2018-09-07
申请号:CN201810166678.5
申请日:2018-02-28
申请人: 山东大学第二医院
IPC分类号: G01N21/64
CPC分类号: G01N21/64
摘要: 本发明公开了一种酶法检测氧化三甲胺TMAO的方法及其应用,该检测方法利用TMAO脱甲基酶tdm、甲醛脱氢酶fadh、甲酸脱氢酶fdh和黄递酶的多酶组合体系,实现TMAO的荧光测定,该方法可用于开发TMAO检测试剂盒;本发明的酶法检测氧化三甲胺TMAO的方法克服了TMAO代谢途径中没有NAD依赖性脱氢酶参与,无法直接基于脱氢酶-黄递酶耦合测定的缺点,通过tdm-fadh-fdh-黄递酶多酶耦合,构建了荧光测定TMAO的体系,在该体系中,1个TMAO分子分解成两个荧光信号,灵敏度高,检测迅速稳定,重复性好,操作简便,成本较低。
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公开(公告)号:CN110305906B
公开(公告)日:2021-11-12
申请号:CN201910650287.5
申请日:2019-07-18
申请人: 山东大学第二医院
摘要: 本发明公开了一种靶向PDL1的CAR嵌合受体的慢病毒载体质粒,包含以下编码序列:专门识别PDL1抗原的PD1蛋白的胞外域编码序列,人CD8铰链区编码序列、CD28跨膜区编码序列、人CD28胞内域编码序列和人CD3ζ编码序列;其编码序列为SEQ ID NO:1;本发明设计合成专门识别PD‑L1抗原的PD1胞外域,连带其他CAR共有的铰链区、共刺激区域等得到靶向PD‑L1的CAR嵌合受体的慢病毒,并将其感染T细胞,形成识别PD‑L1的CAR‑T细胞,而且PD‑1/PD‑L1结合后将会引起T细胞的激活和对肿瘤细胞的杀伤作用。
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公开(公告)号:CN113082197A
公开(公告)日:2021-07-09
申请号:CN202110498419.4
申请日:2021-05-07
申请人: 山东大学第二医院
摘要: 本发明公开了鸢尾素在制备治疗再生障碍性贫血药物中的应用,给药方式为腹腔注射给药,给药剂量为0.5μg/g;本发明的鸢尾素在制备治疗再生障碍性贫血药物中的应用,由于鸢尾素无种属特异性,组织相容性好,因此对再生障碍性贫血患者无免疫排斥反应;不仅适合于免疫细胞介导的再生障碍性贫血,也适合于非免疫介导的急性再障,特别是遗传性贫血病,为制备再生障碍性贫血药物提供了一个新的干预靶点,将鸢尾素应用到各种类型的再生障碍性贫血相关的药物开发中,为再生障碍性贫血药物的研究提供了全新的选择和思路,扩宽了再生障碍性贫血药物的选择领域。
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公开(公告)号:CN110055281B
公开(公告)日:2020-09-01
申请号:CN201910512556.1
申请日:2019-06-13
申请人: 山东大学第二医院
IPC分类号: C12N15/867 , C12N7/01 , C12N5/10
摘要: 本发明公开了一种用于制备CAR‑T的慢病毒载体质粒及其制备方法和用途,含有双启动子;酶切位点充足,易于插入基因;含有T2A序列,T2A序列能使连接的两个基因同时表达;本发明的用于制备CAR‑T的慢病毒载体,酶切位点充足,组件丰富,易于改造,方便载体的构建;本发明的用于制备CAR‑T的慢病毒载体应用广泛,可用于构建单CAR及多CAR、表达自杀基因或筛选基因等,也可用于构建表达细胞因子的第四代CAR,能满足CAR‑T中慢病毒载体质粒同时表达多个基因的要求;利用该慢病毒载体包装的慢病毒滴度高,利用该慢病毒载体质粒制备的慢病毒感染T细胞的效率高,并且制备的CAR‑T细胞具有较大的杀伤力。
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公开(公告)号:CN111378690A
公开(公告)日:2020-07-07
申请号:CN202010244429.0
申请日:2020-03-31
申请人: 山东大学第二医院
IPC分类号: C12N15/867 , C12N5/10 , C12N15/62
摘要: 本发明涉及一种嵌合抗原受体T细胞的制备方法,包括步骤如下:嵌合抗原受体慢病毒质粒的构建;慢病毒的制备;原代CD3+T细胞的筛选;原代CD3+T细胞的感染,感染后即得嵌合抗原受体T细胞。本发明中嵌合抗原受体T细胞的制备方法经过优化,省去了T细胞体外活化及扩增培养的步骤,T细胞离体培养时间大大缩短,节省了大量时间,有助于降低T细胞在体外培养污染的可能性,使得嵌合抗原受体T细胞制备过程更加快捷,能够限制T细胞的分化,最大程度发挥嵌合抗原受体T细胞的杀伤作用,本发明制备的嵌合抗原受体T细胞比采用常规方法制备的嵌合抗原受体T细胞杀伤能力更强、治疗效果更佳。
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公开(公告)号:CN113082197B
公开(公告)日:2022-07-26
申请号:CN202110498419.4
申请日:2021-05-07
申请人: 山东大学第二医院
摘要: 本发明公开了鸢尾素在制备治疗再生障碍性贫血药物中的应用,给药方式为腹腔注射给药,给药剂量为0.5μg/g;本发明的鸢尾素在制备治疗再生障碍性贫血药物中的应用,由于鸢尾素无种属特异性,组织相容性好,因此对再生障碍性贫血患者无免疫排斥反应;不仅适合于免疫细胞介导的再生障碍性贫血,也适合于非免疫介导的急性再障,特别是遗传性贫血病,为制备再生障碍性贫血药物提供了一个新的干预靶点,将鸢尾素应用到各种类型的再生障碍性贫血相关的药物开发中,为再生障碍性贫血药物的研究提供了全新的选择和思路,扩宽了再生障碍性贫血药物的选择领域。
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公开(公告)号:CN110684100A
公开(公告)日:2020-01-14
申请号:CN201910832036.9
申请日:2019-09-04
申请人: 山东大学第二医院
IPC分类号: C07K14/575 , C12N15/81 , A61K38/22 , A61P3/04 , C12R1/84
摘要: 本发明公开了一种分泌型FNDC5蛋白,不含跨膜结构域,可直接分泌并释放到血液中;所述分泌型FNDC5蛋白的氨基酸序列为SEQ ID NO:1;本发明的分泌型FNDC5蛋白结构简单,获得方便;本发明的分泌型FNDC5蛋白能用于治疗肥胖相关代谢紊乱;高脂喂养的肥胖小鼠模型腹腔注射分泌型FNDC5重组蛋白后,可有效改善葡萄糖和胰岛素耐量,表明此蛋白可明显改善肥胖患者糖代谢紊乱和胰岛素抵抗;可明显缓解脂肪肝发生,降低血浆胆固醇、游离脂肪酸及甘油三酯的水平,表明此蛋白可改善肥胖患者脂代谢紊乱。本发明的分泌型FNDC5蛋白,可以作为新的治疗代谢性疾病的药物靶点进行开发。
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公开(公告)号:CN116949099A
公开(公告)日:2023-10-27
申请号:CN202310852004.1
申请日:2023-07-12
申请人: 山东大学第二医院
IPC分类号: C12N15/867 , C12N15/62 , C12N5/10 , A61K39/00 , A61P35/00
摘要: 一种靶向CD38和CS1抗原的并联嵌合抗原受体T细胞及其制备方法和应用合成出能同时识别CD38抗原和CS1抗原的并联抗CD38‑CS1的胞外域,连带其他CAR共有的铰链区、共刺激区域等得到靶向CD38和CS1的CAR嵌合受体,制成慢病毒载体质粒,并将其感染T细胞,形成能同时识别CD38和CS1两种抗原的CAR‑T细胞(并联抗CD38‑CS1 CAR‑T细胞和并联抗CS1‑CD38 CAR‑T细胞),有效避免了由于抗原逃逸导致的肿瘤复发;并且与单特异性CAR‑T相比,明显提高了肿瘤的杀伤效率。本发明的同时靶向CD38和CS1的CAR嵌合受体的慢病毒载体质粒,在制备过程中经过对CAR序列不断改良,精简其长度,并经过效果验证,得到了靶向CD38和CS1的并联双CAR的序列。
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