公开(公告)号：CN116162648A

公开(公告)日：2023-05-26

申请号：CN202211607318.7

申请日：2022-12-14

Applicant: 山东农业大学

Inventor： 包志龙 ,  马方放 ,  卞玉梅 ,  张旭

IPC: C12N15/84 ,  C12N15/34 ,  C12N1/21 ,  A01G7/06 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明属于生命科学技术领域，涉及一种番茄黄化曲叶病毒接种方法，包括如下步骤：(1)接种载体构建；(2)培养菌株A和菌株B；(3)调整菌液；(4)菌株孵育；(5)番茄幼苗浸染；(6)番茄幼苗培养。本发明本发明采用将番茄黄化曲叶病毒基因组与TRV病毒载体进行整合，构建的pTRV2‑TYLCV重组病毒，并采用真空渗透的方式侵染番茄幼苗，显著提高了TYLCV的侵染番茄效率和番茄植株发病速率及症状的典型性，侵染番茄速度快，效率高，发病症状明显，有助于高效筛选抗黄化曲叶病毒病的番茄品种，且操作简单，接种效率高，发病症状稳定，可用于大规模接种，不借助粉虱传播，没有失控风险。

公开(公告)号：CN117143904A

公开(公告)日：2023-12-01

申请号：CN202311128888.2

申请日：2023-09-04

Applicant: 山东农业大学

Inventor： 包志龙 ,  马方放 ,  卞玉梅 ,  王歌 ,  牛晨旭

IPC: C12N15/82 ,  C12N15/40

Abstract: 本发明涉及一种番茄褪绿病毒病的接病技术，属于生命科学技术领域，包括以下步骤：(1)基于烟草脆裂病毒pTRV2质粒，构建载体质粒；(2)分别培养含有pTRV2质粒、pTRV2‑RNA1质粒和pTRV2‑RNA2质粒的农杆菌菌株；(3)调整上述菌液的浓度；(4)菌株孵育；(5)番茄幼苗浸染；(6)侵染后的番茄幼苗培养。本发明采用将番茄褪绿病毒ToCV基因组RNA1和RNA2与烟草脆裂病毒pTRV2载体进行整合，构建的pTRV2‑RNA1和pTRV2‑RNA2重组病毒，并采用针筒注射子叶的方式侵染番茄幼苗，提高了ToCV的侵染番茄效率和番茄植株发病速率及症状的典型性，侵染番茄速度快，效率高，发病症状明显，有助于高效筛选抗褪绿病毒病的番茄品种，且操作简单，接种效率高，发病症状稳定，可用于大规模接种。