公开(公告)号：CN115925858A

公开(公告)日：2023-04-07

申请号：CN202211425815.5

申请日：2022-11-15

Applicant: 安徽大学绿色产业创新研究院

Inventor： 罗学才 ,  施昊 ,  尹若春

IPC: C07K14/435 ,  C12N15/70 ,  C12N15/12 ,  C12P21/06 ,  C07K1/22

Abstract: 本发明公开了一种异源表达的贻贝蛋白前体及其应用，涉及基因工程、发酵工程与应用生物学领域，所述贻贝蛋白(Mfp2‑6)前体具有如SEQ ID NO.1‑5任一所示的氨基酸序列，所述贻贝蛋白前体表达菌株为酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、毕氏酵母(Pichia.pastoris)、大肠杆菌(Escherichia coli)。本发明一种异源表达的贻贝蛋白的制备方法，与其他物理、化学和生物合成技术相比，贻贝蛋白更容易制备，且制备成本低，大规模应用更经济，且整个工艺过程中所添加的酶制剂及加工助剂安全无害。

公开(公告)号：CN115747246A

公开(公告)日：2023-03-07

申请号：CN202211423770.8

申请日：2022-11-15

Applicant: 安徽大学绿色产业创新研究院

Inventor： 施昊 ,  张义玲 ,  罗学才 ,  尹若春

IPC: C12N15/81 ,  C12N15/12 ,  C07K14/435 ,  C07K1/22 ,  C12P21/02 ,  C12R1/85

Abstract: 本发明公开了一种贻贝蛋白的生物转化生产方法，涉及基因工程、发酵工程与应用生物学领域，具体步骤为：(1)构建包含贻贝蛋白前体的工程菌株；(2)将所述工程菌株经过活化和扩大化培养后进行蛋白发酵表达，发酵结束后，破碎菌体，使用亲和层析柱纯化发酵产物，获得纯化产物；(3)将所述纯化产物加入复合转化酶体系，进行酶转化，酶转化结束后，使用亲和层析柱，分离纯化转化产物，将纯化产物冷冻干燥，溶于酸性溶液中，获得贻贝蛋白。整个贻贝蛋白合成及重组过程中，真核生物的表达量高，发酵液中目标产物浓度大，经酶法重组后贻贝蛋白的生物学活性与天然贻贝蛋白类似。