公开(公告)号：CN103509787B

公开(公告)日：2015-03-25

申请号：CN201310496889.2

申请日：2013-10-21

Applicant: 安徽大学

Inventor： 孙庆业 ,  李杨 ,  杨扬

IPC: C12N15/10

Abstract: 本发明公开了一种提取酸化重金属尾矿中基因组总DNA的方法，在酸化重金属尾矿中加入TE1缓冲液，涡旋振荡并离心处理后，加入TE2提取缓冲液和溶菌酶进行水浴处理；在液氮中冷却后在沸水浴中放置处理多次；加入SDS和蛋白酶K消化后进行离心处理；取离心后的上清液依次进行加入预冷的8mol/L KAc进行冰浴后进行离心处理、加入酚氯仿异戊醇进行离心处理、加入氯仿异戊醇进行离心处理、加入3mol/L NaAc和预冷异丙醇。进行离心处理后，弃去离心后的上清液，用乙醇洗涤沉淀后自然晾干，加入TE溶解沉淀。操作简单，能够有效地避免酸化重金属尾矿的重金属、高盐分、低pH等的影响，提取的DNA条带清晰、完整性好、纯度高、杂质含量少。

公开(公告)号：CN103509787A

公开(公告)日：2014-01-15

申请号：CN201310496889.2

申请日：2013-10-21

Applicant: 安徽大学

Inventor： 孙庆业 ,  李杨 ,  杨扬

IPC: C12N15/10

Abstract: 本发明公开了一种提取酸化重金属尾矿中基因组总DNA的方法，在酸化重金属尾矿中加入TE1缓冲液，涡旋振荡并离心处理后，加入TE2提取缓冲液和溶菌酶进行水浴处理；在液氮中冷却后在沸水浴中放置处理多次；加入SDS和蛋白酶K消化后进行离心处理；取离心后的上清液依次进行加入预冷的8mol/L KAc进行冰浴后进行离心处理、加入酚氯仿异戊醇进行离心处理、加入氯仿异戊醇进行离心处理、加入3mol/L NaAc和预冷异丙醇。进行离心处理后，弃去离心后的上清液，用乙醇洗涤沉淀后自然晾干，加入TE溶解沉淀。操作简单，能够有效地避免酸化重金属尾矿的重金属、高盐分、低pH等的影响，提取的DNA条带清晰、完整性好、纯度高、杂质含量少。