公开(公告)号：CN105132417A

公开(公告)日：2015-12-09

申请号：CN201510564178.3

申请日：2015-09-07

Applicant: 安徽农业大学

Inventor： 李叶云 ,  班秋艳 ,  添先凤 ,  谢小芳 ,  江昌俊

IPC: C12N15/11 ,  C12Q1/68

Abstract: 本发明涉及一种茶树miRNA荧光定量PCR内参基因Pc-222-3p，其具有如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列，及其筛选方法，该方法挑选了6个常见植物miRNA内参基因，和3个茶树miRNA作为候选内参基因，利用qRT-PCR技术，通过BestKeeper和geNorm两个软件来评估候选内参基因在不同低温胁迫下及不同茶树组织中的表达稳定性，以期为茶树低温胁迫下miRNA差异表达分析的内参基因选择提供参考。获得的茶树miRNA荧光定量PCR内参基因Pc-222-3p在不同温度处理下和在茶树不同组织中，其基因表达均稳定，可以作为茶树低温胁迫下miRNA荧光定量PCR的内参基因。

公开(公告)号：CN105132417B

公开(公告)日：2017-09-26

申请号：CN201510564178.3

申请日：2015-09-07

Applicant: 安徽农业大学

Inventor： 李叶云 ,  班秋艳 ,  添先凤 ,  谢小芳 ,  江昌俊

IPC: C12N15/11 ,  C12Q1/68

Abstract: 本发明涉及一种茶树miRNA荧光定量PCR内参基因Pc‑222‑3p，其具有如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列，及其筛选方法，该方法挑选了6个常见植物miRNA内参基因，和3个茶树miRNA作为候选内参基因，利用qRT‑PCR技术，通过BestKeeper和geNorm两个软件来评估候选内参基因在不同低温胁迫下及不同茶树组织中的表达稳定性，以期为茶树低温胁迫下miRNA差异表达分析的内参基因选择提供参考。获得的茶树miRNA荧光定量PCR内参基因Pc‑222‑3p在不同温度处理下和在茶树不同组织中，其基因表达均稳定，可以作为茶树低温胁迫下miRNA荧光定量PCR的内参基因。

公开(公告)号：CN103667259A

公开(公告)日：2014-03-26

申请号：CN201310654955.4

申请日：2013-12-05

Applicant: 安徽农业大学

Inventor： 李叶云 ,  添先凤 ,  周月琴 ,  江昌俊

IPC: C12N15/10

Abstract: 本发明公开了一种茶树RNA提取方法，步骤包括：取茶树组织，加入不溶性聚乙烯吡咯烷酮PVPP，液氮研磨成粉末，加入提取液，水浴并离心，获得的上清液中加入无水乙醇，沉淀RNA，再用吸附柱进行吸附，洗涤吸附柱，最后用RNA-free水洗脱，获得茶树RNA。该方法是将现有技术的CTAB法与RNA提取试剂盒结合，在现有茶树RNA提取方法上做了进一步优化，与现有技术相比，该方法提取茶树RNA的时间短，获得的茶树RNA的提取率和纯度高。