公开(公告)号：CN115948414A

公开(公告)日：2023-04-11

申请号：CN202211187647.0

申请日：2022-09-28

Applicant: 安徽农业大学

Inventor： 蔡永萍 ,  张蓥杰 ,  王涵 ,  周欣月 ,  周祺芳

IPC: C12N15/29 ,  C12N15/81 ,  C12N1/16 ,  C12Q1/04 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明提供了一种基于Y2H筛选梨石细胞负调控因子互作蛋白的方法，包括如下步骤：获取梨石细胞负调控转录因子；构建重组文库载体；通过同源重组将筛选的梨石细胞负调控转录因子基因连接到pGBKT7载体，形成“重组诱饵载体”；自激活验证；酵母双杂交文库筛选；阳性鉴定；筛选并确定目的序列；点对点阳性验证，如菌落变为蓝色则说明阳性验证成功，蓝色的深浅反映互作能力强弱。本发明方法可快速筛选出与梨石细胞抑制转录因子相互作用的蛋白质、并鉴定其可能的生物学功能，还可以判断出梨石细胞抑制转录因子与互作蛋白的相互作用强弱，为改善梨果实石细胞含量，提高果实口感提供分子生物学基础。