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公开(公告)号：CN112921038B
公开(公告)日：2022-08-02
申请号：CN202110325672.X
申请日：2021-03-26
IPC: C12N15/113 , C12N9/22 , C12N15/70 , C12N15/90
Abstract: 本发明公开了同源重组机制介导的精准序列替换基因编辑方法及元件结构，所述方法包括：(1)以靶区段300‑400bp DNA序列为基础，其中插入或缺失多个DNA片断形成MsDFID序列，同时作为向导RNA和供体模板，也被称为MsDFID向导和供体RNA；(2)在所述MsDFID供体模板3’端连接成簇且规律间隔短重复DNA回文结构，即PCRISR，或Cas9向导RNA骨架，或大肠杆菌CRISPR‑Cas3回文重复序列。后面这三种序列均作为向导RNA骨架；(3)用上述融合序列构建供体载体，转化大肠杆菌，MsDFID供体模板内供体位点所含DNA片断插入或缺失被替换到靶区段对应位点。本发明成功实现以序列替换为唯一效果的基因编辑，解决当前基因编辑系统面临的几个主要问题：对PAM序列依赖、较高脱靶风险和难以实现精准序列替换。
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公开(公告)号：CN112921038A
公开(公告)日：2021-06-08
申请号：CN202110325672.X
申请日：2021-03-26
IPC: C12N15/113 , C12N9/22 , C12N15/70 , C12N15/90
Abstract: 本发明公开了同源重组机制介导的精准序列替换基因编辑方法及元件结构，所述方法包括：(1)以靶区段300‑400bp DNA序列为基础，其中插入或缺失多个DNA片断形成MsDFID序列，同时作为向导RNA和供体模板，也被称为MsDFID向导和供体RNA；(2)在所述MsDFID供体模板3’端连接成簇且规律间隔短重复DNA回文结构，即PCRISR，或Cas9向导RNA骨架，或大肠杆菌CRISPR‑Cas3回文重复序列。后面这三种序列均作为向导RNA骨架；(3)用上述融合序列构建供体载体，转化大肠杆菌，MsDFID供体模板内供体位点所含DNA片断插入或缺失被替换到靶区段对应位点。本发明成功实现以序列替换为唯一效果的基因编辑，解决当前基因编辑系统面临的几个主要问题：对PAM序列依赖、较高脱靶风险和难以实现精准序列替换。
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公开(公告)号：CN113025472B
公开(公告)日：2022-04-26
申请号：CN202110331460.2
申请日：2021-03-29
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明涉及菌剂制备技术领域，公开了一种用于小麦种植的微生物菌剂制备装置，包括发酵罐，所述发酵罐的顶部可拆卸连接有顶盖，所述发酵罐顶面沿周向分布若干个转动安装槽，转动安装槽沿发酵罐高度方向设置，转动安装槽的横截面为圆形，发酵罐内壁分布若干和转动安装槽连通的连通孔，且所述发酵罐壳体内还设有与各个连通孔对应连通的废气排放通道，发酵罐壳体外侧具有夹层，所述连通孔的另一端与夹层内部连通，所述夹层内设有滤芯，且夹层的外侧壁安装有排气机构、以排出夹层内排出的废气，每个转动安装槽内均转动插接有底部封口的活动管。本发明结构简单，能够向发酵罐内输入氧气，避免氧气浪费，提高资源利用率，使用环保卫生。
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公开(公告)号：CN113025472A
公开(公告)日：2021-06-25
申请号：CN202110331460.2
申请日：2021-03-29
Applicant: 安徽农业大学
Abstract: 本发明涉及菌剂制备技术领域，公开了一种用于小麦种植的微生物菌剂制备装置，包括发酵罐，所述发酵罐的顶部可拆卸连接有顶盖，所述发酵罐顶面沿周向分布若干个转动安装槽，转动安装槽沿发酵罐高度方向设置，转动安装槽的横截面为圆形，发酵罐内壁分布若干和转动安装槽连通的连通孔，且所述发酵罐壳体内还设有与各个连通孔对应连通的废气排放通道，发酵罐壳体外侧具有夹层，所述连通孔的另一端与夹层内部连通，所述夹层内设有滤芯，且夹层的外侧壁安装有排气机构、以排出夹层内排出的废气，每个转动安装槽内均转动插接有底部封口的活动管。本发明结构简单，能够向发酵罐内输入氧气，避免氧气浪费，提高资源利用率，使用环保卫生。
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