公开(公告)号：CN104745573A

公开(公告)日：2015-07-01

申请号：CN201510205775.7

申请日：2015-04-27

Applicant: 安徽农业大学

Inventor： 刘怡 ,  司红起 ,  郭小浩 ,  常井明

IPC: C12N15/10 ,  C12N15/53 ,  C12Q1/68 ,  A01H5/00

Abstract: 本发明提供了小麦肉桂醇脱氢酶基因DNA序列扩增方法及其引物，其方法包括如下步骤：1)将小麦的肉桂醇脱氢酶基因的cDNA序列与其近缘物种的肉桂醇脱氢酶基因的DNA序列进行比对，得到肉桂醇脱氢酶基因的保守区域序列，设计一对扩增引物，扩增其中的第一内含子序列；2)根据步骤1)中获得的比对结果，设计一对扩增引物，扩增其中的第二内含子序列；3)根据步骤1)中获得的比对结果，设计一对扩增引物，扩增其中的第三内含子序列；4)将上述扩增出的三个内含子拼接，在拼接全长的首尾端设计一对扩增引物，通过长PCR扩增方法扩增出小麦肉桂醇脱氢酶基因DNA序列全长，将上述扩增产物切胶回收，纯化后测序检测。该方法能有效扩增出CAD基因全长。

公开(公告)号：CN104745573B

公开(公告)日：2018-01-12

申请号：CN201510205775.7

申请日：2015-04-27

Applicant: 安徽农业大学

Inventor： 刘怡 ,  司红起 ,  郭小浩 ,  常井明

IPC: C12N15/10 ,  C12N15/53 ,  C12Q1/68 ,  A01H5/00

Abstract: 本发明提供了小麦肉桂醇脱氢酶基因DNA序列扩增方法及其引物，其方法包括如下步骤：1)将小麦的肉桂醇脱氢酶基因的cDNA序列与其近缘物种的肉桂醇脱氢酶基因的DNA序列进行比对，得到肉桂醇脱氢酶基因的保守区域序列，设计一对扩增引物，扩增其中的第一内含子序列；2)根据步骤1)中获得的比对结果，设计一对扩增引物，扩增其中的第二内含子序列；3)根据步骤1)中获得的比对结果，设计一对扩增引物，扩增其中的第三内含子序列；4)将上述扩增出的三个内含子拼接，在拼接全长的首尾端设计一对扩增引物，通过长PCR扩增方法扩增出小麦肉桂醇脱氢酶基因DNA序列全长，将上述扩增产物切胶回收，纯化后测序检测。该方法能有效扩增出CAD基因全长。