公开(公告)号：CN114671938A

公开(公告)日：2022-06-28

申请号：CN202210392371.3

申请日：2022-04-13

Applicant: 安徽农业大学

Inventor： 苏时萍 ,  刘帆 ,  刘鑫鑫 ,  陈芳芳 ,  李西雷 ,  张君

IPC: C07K14/46 ,  C07K1/22 ,  C12N15/12 ,  C12N15/70 ,  C07K16/18 ,  C07K16/06

Abstract: 本发明公开了大口黑鲈Nesfatin‑1蛋白及其原核表达方法与应用。本发明首次利用大肠杆菌原核表达系统表达出大口黑鲈Nesfatin‑1蛋白，利用镍柱亲和层析法纯化得到大量可溶性重组蛋白，浓度达到1.05mg/mL；ELISA法检测多克隆抗体效价达1∶204800以上，Western blot方法检测多克隆抗体特异性好，组织免疫荧光方法验证该抗体能特异性识别大口黑鲈肝胰脏中的Nesfatin‑1蛋白。采用本方法实现了大口黑鲈Nesfatin‑1蛋白的体外表达和制备出了效价高、特异性好的多克隆抗体，完全可以满足相关实验需要，为深入研究大口黑鲈Nesfatin‑1蛋白生物学功能提供有力工具。