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公开(公告)号:CN118515739A
公开(公告)日:2024-08-20
申请号:CN202410744638.X
申请日:2024-06-11
Applicant: 宁波大学
IPC: C07K14/435 , C12N15/12 , C12N15/70 , C12N1/21 , A23K50/80 , A23K20/147 , A61K38/17 , A61P37/04 , A61P31/04 , C12R1/19
Abstract: 本发明提供一种具有提高刺参免疫效果的功能基因,该功能基因及其特定基因片段编码的蛋白对脂多糖、肽聚糖以及甘露聚糖有结合活性:对刺参致病菌具有明显的凝集和杀菌作用,且能够有效的提高刺参的免疫性能。本发明的功能基因,其编码的蛋白的氨基酸序列为SEQ ID NO:3。其改造体编码的蛋白的氨基酸序列为SEQ ID NO:5。本发明所筛选获得的功能基因编码的蛋白具有高效的结合活性、凝集活性和抑菌活性,将工程菌产生的蛋白投放于刺参养殖环境中,从而提升刺参机体的免疫力,可以为刺参感染弧菌提供一种解决手段。
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公开(公告)号:CN117402884A
公开(公告)日:2024-01-16
申请号:CN202311346928.0
申请日:2023-10-18
Applicant: 宁波大学
Abstract: 本发明提供的从缢蛏中分离的具有凝菌活性的基因,其核苷酸序列为SEQ ID NO:1,其编码蛋白的氨基酸序列为SEQ ID NO:2。本发明还提供一种氨基酸序列为SEQ ID NO:3的胞外结构域蛋白,所述的胞外结构域蛋白可用于结合脂多糖、肽聚糖、甘露聚糖或细菌。本发明构建了对脂多糖、肽聚糖以及甘露聚糖有结合活性,以及对灿烂弧菌、鳗弧菌、大肠杆菌、哈维氏弧菌、副溶血弧菌和粪肠球菌有凝集作用的基因工程菌。所制备的基因工程菌株制备的胞外结构域蛋白具有高效的结合活性和凝集活性,尤其对革兰氏阴性细菌有很强的凝集作用。将工程菌产生的胞外结构域重组蛋白投放于缢蛏养殖环境中,从而提升缢蛏机体的免疫力,预防缢蛏疾病发生。
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公开(公告)号:CN116473013A
公开(公告)日:2023-07-25
申请号:CN202310498418.9
申请日:2023-05-06
Applicant: 宁波大学
Abstract: 本发明公开了一种缢蛏亲贝暂养培育装置及其培育方法。上述暂养培育装置置放于暂养水池中并没于水面以下,其包括呈框架结构的暂养箱体、用于承载缢蛏亲贝的三组培育层架、用于支撑对应培育层架的四组承重角铁、铺覆固定于所述暂养箱体相对应两侧外壁处的两组罩网、装设在所述暂养箱体上的防掉组件、用于向所述暂养箱体送入藻液的饵料入管、以及对所述暂养箱体进行充氧的增氧组件。三组所述培育层架平行布设于所述暂养箱体内。本发明克服了频繁人为颠簸亲贝进行换水、倒池、洗涮等工序对其生活环境的干扰,保证在室内可控最小干扰条件下进行大批量亲贝的促熟、催产、育苗等工作,满足高产高质苗种的产出需求。
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公开(公告)号:CN114097786A
公开(公告)日:2022-03-01
申请号:CN202111282498.1
申请日:2021-11-01
Applicant: 宁波大学
Abstract: 本发明公开了一种完全杀灭灿烂弧菌的方法,特点是在含有灿烂弧菌的菌液中添加特定碳源,同时加入四环素,共孵育4‑6小时,即可完全杀灭灿烂弧菌,其中特定碳源为D‑葡萄糖、L‑谷氨酸、L‑苯丙氨酸和L‑天冬氨酸中的至少一种,联用的抗生素为四环素;浓度为15mM的D‑葡萄糖、10mM的L‑谷氨酸、40mM的L‑苯丙氨酸和5mM的L‑天冬氨酸和400µg/mL的四环素能够达到完全杀灭灿烂弧菌的效果,优点是可对灿烂弧菌进行完全的清除,高效、简单方便且安全,有望在灿烂弧菌清除中发挥重要作用。
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公开(公告)号:CN107267519B
公开(公告)日:2020-05-19
申请号:CN201710331881.9
申请日:2017-05-10
Applicant: 宁波大学
Abstract: 本发明公开了缢蛏C1q基因、编码蛋白及其克隆方法和重组缢蛏C1q基因工程菌构建方法,特点是缢蛏C1q基因序列如SEQIDNO.1所示;其克隆方法为根据与C1q基因同源的表达序列标签EST序列设计3’RACE的巢式引物,采用3’RACE技术扩增基因全长;缢蛏C1q基因编码蛋白氨基酸序列如SEQIDNO.2所示,用分别含有BamH I位点和Xho I位点的引物扩增缢蛏C1q蛋白;将克隆得到的目的基因插入载体获得重组质粒,对重组质粒进行诱导表达,再进行纯化即获得基因工程菌,优点是对脂多糖、肽聚糖、甘露聚糖具有结合能力,对大肠杆菌、鳗弧菌和副溶血弧菌有明显的凝集作用。
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公开(公告)号:CN104745595B
公开(公告)日:2017-06-27
申请号:CN201510136343.5
申请日:2015-03-27
Applicant: 宁波大学
Abstract: 本发明公开了一种刺参BPI基因、编码蛋白及其克隆方法和重组刺参BPI基因工程菌构建方法,特点是刺参BPI基因序列如SEQIDNO.1所示;其克隆方法为根据与BPI基因同源的表达序列标签EST序列设计RACE的巢式引物,采用RACE技术扩增基因全长;刺参BPI蛋白序列如SEQIDNO.2所示,其N端蛋白结构域序列如SEQID NO.3所示;用分别含有BamH I位点和Not I位点的引物扩增刺参BPI蛋白的N端结构域;将克隆得到的目的基因插入载体获得重组质粒,对重组质粒进行诱导表达,再进行纯化复性即获得基因工程菌,优点是对副溶血弧菌,哈维氏弧菌,藤黄微球菌具有明显的杀菌作用。
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公开(公告)号:CN105040109B
公开(公告)日:2017-05-03
申请号:CN201510284160.8
申请日:2015-05-28
Applicant: 宁波大学
Abstract: 本发明公开了用于检测环境污染物DEHP的基因芯片及其制备方法和应用,特点是包括探针1、探针2和探针3,核苷酸序列如SEQ ID NO.1‑3所示,制备方法为总RNA的提取、cDNA合成、PCR扩增、产物片段回收、芯片制备,其PCR扩增引物具有SEQ ID NO.4‑9所示的氨基酸序列,应用为样品与基因芯片杂交,探针2与探针3所对应的基因表达下调,探针1对应的基因表达变化不显著,则对0.4 mg/L DEHP响应灵敏;探针1与探针3所对应的基因表达上调,探针2对应的基因表达变化不显著,则对4 mg/L DEHP响应灵敏,优点是特异性强、灵敏度高、检测速度快。
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公开(公告)号:CN105040109A
公开(公告)日:2015-11-11
申请号:CN201510284160.8
申请日:2015-05-28
Applicant: 宁波大学
Abstract: 本发明公开了用于检测环境污染物DEHP的基因芯片及其制备方法和应用,特点是包括探针1、探针2和探针3,核苷酸序列如SEQ ID NO.1-3所示,制备方法为总RNA的提取、cDNA合成、PCR扩增、产物片段回收、芯片制备,其PCR扩增引物具有SEQ ID NO.4-9所示的氨基酸序列,应用为样品与基因芯片杂交,探针2与探针3所对应的基因表达下调,探针1对应的基因表达变化不显著,则对0.4 mg/L DEHP响应灵敏;探针1与探针3所对应的基因表达上调,探针2对应的基因表达变化不显著,则对4 mg/L DEHP响应灵敏,优点是特异性强、灵敏度高、检测速度快。
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公开(公告)号:CN104628148A
公开(公告)日:2015-05-20
申请号:CN201410764152.9
申请日:2014-12-12
Applicant: 宁波大学
IPC: C02F3/34 , C02F103/08
CPC classification number: C02F3/34 , C02F2103/08 , C02F2303/04
Abstract: 本发明公开了一种铜绿假单胞菌荧光铁载体的新用途,特点是该荧光铁载体对2216E培养基或海水中灿烂弧菌生长可产生抑制作用,该荧光铁载体来自铜绿假单胞菌,通过铜NTA琼脂糖柱子进行亲和层析得到纯化的荧光铁载体,加入3%体积纯化的荧光铁载体到含有灿烂弧菌的2216E培养基中,30℃培养24小时,对灿烂弧菌的抑制率达到50%:加入1%体积纯化的荧光铁载体都含有灿烂弧菌的海水中,30℃孵育24小时,可完全抑制海水中灿烂弧菌的生长,优点是该铁载体可望在病原灿烂弧菌的抑制中发挥重要作用。
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公开(公告)号:CN102382888B
公开(公告)日:2014-03-12
申请号:CN201110349281.8
申请日:2011-11-08
Applicant: 宁波大学
Abstract: 本发明公开了腐败希瓦氏菌的免疫磁珠-FQ-PCR检测方法,通过腐败希瓦氏菌抗体溶液制备,再与磁珠制备成免疫磁珠,可以对含有腐败希瓦氏菌的样品进行细菌富集,使得腐败希瓦氏菌浓缩、纯净,然后进行煮沸分解得到模板DNA溶液,与由含有荧光染料的TaqTMII混合液、FQR引物溶液和FQF引物溶液反应体系中进行PCR反应,根据PCR反应中的荧光信号有无响应,判断待检样品溶液是否含有腐败希瓦氏菌,该反应是对腐败希瓦氏菌特异性引物进行的FQ-PCR荧光反应,检测简便,灵敏,定性检测时间较低短,检测效率高,因此本发明是一种检测时间较低短、检测效率和灵敏度较高的腐败希瓦氏菌的免疫磁珠-FQ-PCR检测方法。
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