一种快速分离培养人气道上皮细胞的方法及优化培养基

    公开(公告)号:CN107974429B

    公开(公告)日:2021-06-29

    申请号:CN201711223340.0

    申请日:2017-11-29

    Abstract: 本发明公开一种快速分离培养人气道上皮细胞的方法及优化培养基,该优化培养基包括DMEM培养基、F‑12Nutirient Mix培养基、0.5mg/ml的氢化可的松、胎牛血清、25ug/ml的表皮生长因子、5mg/ml的胰岛素、11.7uM的霍乱毒素、10mM的ROCK1抑制剂、10mM的BMP4拮抗剂。本发明利用优化的培养基培养人气道上皮细胞的方法,不仅大大的简化了需要3T3 J2细胞为饲养层而培养上皮细胞的步骤,只需要将链霉蛋白酶消化的原代人气道上皮细胞培养于本发明优化的培养基中,且获得了快速分离且无限传代培养的人气道上皮细胞,将传代培养的人气道上皮细胞进行体外扩增培养,达到20代以上,即可获得足够量的种子细胞用于如体外细胞互作模型研究等诸多后续的体内外研究中。

    一种人子宫内膜腺上皮细胞的分离培养方法及优化培养基

    公开(公告)号:CN108118026A

    公开(公告)日:2018-06-05

    申请号:CN201711223818.X

    申请日:2017-11-29

    Abstract: 本发明公开一种人子宫内膜腺上皮细胞的分离培养方法及优化培养基,该优化培养基包括DMEM培养基、F-12 Nutirient Mix培养基、0.5mg/ml的氢化可的松、胎牛血清、25ug/ml的表皮生长因子、5mg/ml的胰岛素、11.7uM的霍乱毒素、10mM的ROCK1抑制剂、10mM的BMP4拮抗剂、10mM的WNT拮抗剂。本发明分离培养人子宫内膜腺上皮细胞的方法,通过将胶原酶IV和Accumax细胞分散液联合消化获得的腺上皮细胞培养于本发明优化的培养基中,使分离得到的人子宫内膜腺上皮细胞传代培养至P1代呈克隆增值,可以有效地将人的子宫内膜腺上皮细胞在体外培养2代,为人子宫内膜腺上皮细胞进行体外细胞互作模型研究提供了一定量的种子细胞。

    建立原代人子宫内膜上皮细胞气液相培养模型的方法

    公开(公告)号:CN108342322A

    公开(公告)日:2018-07-31

    申请号:CN201810157195.9

    申请日:2018-02-24

    Abstract: 本发明公开一种建立原代人子宫内膜上皮细胞气液相培养模型的方法,其包括分离纯化子宫内膜腺上皮细胞、建立原代人子宫内膜上皮细胞气液相培养模型与鉴定子宫内膜上皮细胞气液相培养模型,具体步骤:收集人子宫内膜,分离子宫内膜腺上皮细胞,收集子宫内膜上皮细胞,获得原代培养的子宫内膜腺上皮细胞,传代培养子宫内膜腺上皮细胞,人子宫内膜上皮细胞气液相培养模型的建立及鉴定。通过本发明的方法建立的原代人子宫内膜上皮细胞气液相培养模型,并对其进行鉴定,不仅可以用于其生理功能的研究,也可以用于子宫内膜异位症、功能失调性子宫出血、子宫内膜癌等多种疾病发病机制的进一步研究,对体外人子宫内膜上皮细胞的实验研究具有重要的意义。

    一种快速分离培养人气道上皮细胞的方法及优化培养基

    公开(公告)号:CN107974429A

    公开(公告)日:2018-05-01

    申请号:CN201711223340.0

    申请日:2017-11-29

    Abstract: 本发明公开一种快速分离培养人气道上皮细胞的方法及优化培养基,该优化培养基包括DMEM培养基、F-12Nutirient Mix培养基、0.5mg/ml的氢化可的松、胎牛血清、25ug/ml的表皮生长因子、5mg/ml的胰岛素、11.7uM的霍乱毒素、10mM的ROCK1抑制剂、10mM的BMP4拮抗剂。本发明利用优化的培养基培养人气道上皮细胞的方法,不仅大大的简化了需要3T3 J2细胞为饲养层而培养上皮细胞的步骤,只需要将链霉蛋白酶消化的原代人气道上皮细胞培养于本发明优化的培养基中,且获得了快速分离且无限传代培养的人气道上皮细胞,将传代培养的人气道上皮细胞进行体外扩增培养,达到20代以上,即可获得足够量的种子细胞用于如体外细胞互作模型研究等诸多后续的体内外研究中。

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