一种鸟苷酸环化酶催化合成环鸟苷二磷酸的方法

    公开(公告)号:CN110499323A

    公开(公告)日:2019-11-26

    申请号:CN201910243224.8

    申请日:2019-03-28

    Abstract: 本发明提供一种鸟苷酸环化酶催化合成环鸟苷二磷酸的方法,具体包括以下步骤:1)基因序列的获取;2)突变重组载体的构建;3)酶切;4)转化;5)诱导表达;6)破菌收集蛋白;7)蛋白纯化;8)蛋白透析;9)采用BCA法测定蛋白浓度;10)蛋白体外催化反应。与现有技术相比,本发明利用一种新的基因-PA0847的编码蛋白作为c-di-gmp催化酶;对野生型PA0847蛋白进行了点突变和基因工程改造;催化酶来源充足,纯化方法稳定简便;合成过程简便,无污染;产物得率稳定,易于纯化。

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