用于子痫前期临床风险评估的长链非编码RNA及其应用

    公开(公告)号:CN112210599A

    公开(公告)日:2021-01-12

    申请号:CN202011080896.0

    申请日:2020-10-11

    Abstract: 用于子痫前期临床风险评估的长链非编码RNA,包括:查阅并分析患者病历资料,收集正常孕妇及子痫前期孕妇胎盘组织;制备胎盘组织石蜡切片,胎盘组织马松染色观察胎盘组织结构改变;生物信息学分析损伤诱导的非编码RNA的结构;提取胎盘组织长链非编码RNA,并检测损伤诱导的非编码RNA表达改变;培养人源胎盘滋养细胞,筛选损伤诱导的非编码RNA干扰片段;干扰损伤诱导的非编码RNA后,检测基质金属蛋白酶2(MMP‑2)蛋白表达改变;干扰损伤诱导的非编码RNA后,划痕试验检测细胞迁移能力及侵袭实验检测细胞侵袭改变。本发明用于子痫前期预防及诊断。本发明样本获取简单便捷,不会造成患者任何创伤,具有较强的可行性。

    一种用于动脉粥样硬化早期预警的分子标志物及其应用

    公开(公告)号:CN112159842A

    公开(公告)日:2021-01-01

    申请号:CN202011080892.2

    申请日:2020-10-11

    Abstract: 一种用于动脉粥样硬化早期预警的分子标志物,包括:(1)MTT比色法检测不同浓度的Hcy对内皮细胞增殖影响,筛选合适浓度;(2)最适浓度Hcy干预细胞后,细胞活力染色检测;(3)最适浓度Hcy干预细胞后,流式细胞术检测内皮细胞凋亡;(4)最适浓度Hcy干预细胞后,实时荧光定量PCR检测LncRNA DINO的表达;(5)转染LncRNA DINO siRNA,干扰LncRNA DINO后,细胞活力染色检测;(6)构建LncRNA DINO siRNA,干扰LncRNA DINO后,流式细胞术检测内皮细胞凋亡;(7)构建LncRNA DINO siRNA,干扰LncRNA DINO后,蛋白免疫印迹检测凋亡相关蛋白的表达。本发明为动脉粥样硬化的早期诊断及预警提供了新的分子靶标,也为治疗提供了新的方向。

    用于子痫前期临床风险评估的长链非编码RNA

    公开(公告)号:CN112210599B

    公开(公告)日:2022-12-27

    申请号:CN202011080896.0

    申请日:2020-10-11

    Abstract: 用于子痫前期临床风险评估的长链非编码RNA,包括以下步骤:查阅并分析患者病历资料,收集正常孕妇及子痫前期孕妇胎盘组织;制备胎盘组织石蜡切片,胎盘组织马松染色观察胎盘组织结构改变;生物信息学分析损伤诱导的非编码RNA的结构;提取胎盘组织长链非编码RNA,并检测损伤诱导的非编码RNA表达改变;培养人源胎盘滋养细胞,筛选损伤诱导的非编码RNA干扰片段;干扰损伤诱导的非编码RNA后,检测基质金属蛋白酶2(MMP‑2)蛋白表达改变;干扰损伤诱导的非编码RNA后,划痕试验检测细胞迁移能力及侵袭实验检测细胞侵袭改变。本发明取材来自胎盘组织,样本获取简单便捷,不会造成患者任何创伤,具有较强的可行性。

    一种与AS斑块炎症相关的miRNA标志物及其筛选方法和应用

    公开(公告)号:CN110423806A

    公开(公告)日:2019-11-08

    申请号:CN201910752932.4

    申请日:2019-08-15

    Abstract: 本发明公开了一种与AS斑块炎症相关的miRNA标志物及其筛选方法和应用,属于生物工程技术领域,以ApoE基因敲除小鼠和THP-1源性泡沫细胞为研究对象,提取组织或细胞的RNA,筛选出与AS相关的基因,在细胞水平验证miR-195-3p和相关炎症因子IL-1β,IL-6和TNF-α的表达变化,建立了由miR-195-3p、IL-1β,IL-6和TNF-α四个因子组成的AS斑块炎症特异性疾病联合诊断方法。该方法简单可靠,取材方便,灵敏度和特异性均与影像学诊断的结果高度吻合,在AS性疾病的早期诊断与预后评估中具有极大的应用价值。

    血管内皮细胞PDHA1基因特异性敲除鼠构建实验方法

    公开(公告)号:CN114181955A

    公开(公告)日:2022-03-15

    申请号:CN202111388529.1

    申请日:2021-11-22

    Abstract: 本发明涉及血管内皮细胞PDHA1基因特异性敲除鼠构建实验方法,具体包括以下步骤:1)繁育足够数量的PDHA1‑Tek‑creERT2(f/f,+)小鼠将上述2只雄鼠和4只雌鼠合笼,在雌鼠出现阴栓时确定雌鼠怀孕;2)小鼠基因鉴定:3)Western blot检测小鼠肺组织中蛋白表达水平;4)实时定量PCR检测小鼠肺组织中mRNA表达水平;5)小鼠肺组织免疫荧光VE‑cadherin和PDHA1共染。本发明优点在于:方案设计合理,可研究疾病与内皮细胞的能量代谢关系,验证糖酵解和氧化磷酸化的限速酶HK2和IDH的表达,证实对血管内皮细胞能量代谢的改变,具有很好的推广前景和医学经济价值。

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