公开(公告)号：CN114574480A

公开(公告)日：2022-06-03

申请号：CN202210353218.X

申请日：2022-04-06

申请人： 天津师范大学

发明人： 刘文彬 ,  龙辰 ,  周安陌 ,  徐畅 ,  翟培 ,  闫春财 ,  孙小雅

IPC分类号： C12N15/10 ,  C12Q1/6806

摘要： 本发明公开了一种提取水体表面混合摇蚊科昆虫蜕皮总DNA的方法。本发明主要考察了样本采用蛹皮提取环境DNA，生理盐水处理以及水浴锅保存时间，此外在裂解时对蛹皮的研磨对DNA提取的影响。重点是解决环境DNA提取困难、质量低等问题，传统提取方法与改进后提取方法电泳条带对比，传统方法提取的DNA模糊，较暗，而改进后方法提取的DNA条带亮，且无拖带现象，证明改进后的方法提取的DNA浓度更大，纯度更高。

公开(公告)号：CN112662677B

公开(公告)日：2022-12-02

申请号：CN202110227984.7

申请日：2021-03-02

申请人： 天津师范大学

发明人： 孙小雅 ,  闫春财 ,  刘文彬 ,  潘丽娜 ,  李敏

IPC分类号： C12N15/12 ,  C12Q1/6888

摘要： 本发明公开了一组红裸须摇蚊Hb基因及其在水质生物监测中的应用。它包括：PaHb‑3，PaHb‑5，PaHb‑13，PaHb‑15、PaHb‑19五个基因序列，为NO:1‑SEQ ID NO:5所示。本发明的目的是解决水质生物监测中用于快速鉴定重金属铜的新型生物标志物开发的问题，实验结果显示：这五个Hb基因可作为监测重金属铜水体污染的生物标志物，本发明的创新点在于开发五种红裸须摇蚊Hb基因用于水质中重金属铜的检测。

公开(公告)号：CN111575277A

公开(公告)日：2020-08-25

申请号：CN202010501687.2

申请日：2020-06-04

申请人： 天津师范大学

发明人： 刘文彬 ,  闫春财 ,  孙小雅 ,  龙辰

IPC分类号： C12N15/10

摘要： 本发明公开了一种提取单个摇蚊科蛹期蜕皮DNA的方法。属于动物分子生物学技术领域。该方法包括如下步骤：预处理、裂解离心、洗脱、富集、酶解、抽提、离心、沉淀、溶解、扩增和电泳检测。与现有技术相比，本发明取得的有益效果为：用蒸馏水处理用以去除杂质，防止干扰提取；通过0.9％NaCl溶液缓慢的渗透作用影响，能使摇蚊蛹期蜕皮上残存的细胞在温和的状态下，逐渐恢复生理活性，并促使细胞中交联的蛋白质与DNA逐步解离；采用本发明方法提取的摇蚊科蛹期蜕皮DNA浓度可达到0.908ng/μl，纯度可达到1.89。

公开(公告)号：CN111575277B

公开(公告)日：2023-10-24

申请号：CN202010501687.2

申请日：2020-06-04

申请人： 天津师范大学

发明人： 刘文彬 ,  闫春财 ,  孙小雅 ,  龙辰

IPC分类号： C12N15/10

摘要： 本发明公开了一种提取单个摇蚊科蛹期蜕皮DNA的方法。属于动物分子生物学技术领域。该方法包括如下步骤：预处理、裂解离心、洗脱、富集、酶解、抽提、离心、沉淀、溶解、扩增和电泳检测。与现有技术相比，本发明取得的有益效果为：用蒸馏水处理用以去除杂质，防止干扰提取；通过0.9％NaCl溶液缓慢的渗透作用影响，能使摇蚊蛹期蜕皮上残存的细胞在温和的状态下，逐渐恢复生理活性，并促使细胞中交联的蛋白质与DNA逐步解离；采用本发明方法提取的摇蚊科蛹期蜕皮DNA浓度可达到0.908ng/μl，纯度可达到1.89。

公开(公告)号：CN112662677A

公开(公告)日：2021-04-16

申请号：CN202110227984.7

申请日：2021-03-02

申请人： 天津师范大学

发明人： 孙小雅 ,  闫春财 ,  刘文彬 ,  潘丽娜 ,  李敏

IPC分类号： C12N15/12 ,  C12Q1/6888

摘要： 本发明公开了一组红裸须摇蚊Hb基因及其在水质生物监测中的应用。它包括：PaHb‑3，PaHb‑5，PaHb‑13，PaHb‑15、PaHb‑19五个基因序列，为NO:1‑SEQ ID NO:5所示。本发明的目的是解决水质生物监测中用于快速鉴定重金属铜的新型生物标志物开发的问题，实验结果显示：这五个Hb基因可作为监测重金属铜水体污染的生物标志物，本发明的创新点在于开发五种红裸须摇蚊Hb基因用于水质中重金属铜的检测。

公开(公告)号：CN114574480B

公开(公告)日：2024-03-01

申请号：CN202210353218.X

申请日：2022-04-06

申请人： 天津师范大学

发明人： 刘文彬 ,  龙辰 ,  周安陌 ,  徐畅 ,  翟培 ,  闫春财 ,  孙小雅

IPC分类号： C12N15/10 ,  C12Q1/6806

摘要： 本发明公开了一种提取水体表面混合摇蚊科昆虫蜕皮总DNA的方法。本发明主要考察了样本采用蛹皮提取环境DNA，生理盐水处理以及水浴锅保存时间，此外在裂解时对蛹皮的研磨对DNA提取的影响。重点是解决环境DNA提取困难、质量低等问题，传统提取方法与改进后提取方法电泳条带对比，传统方法提取的DNA模糊，较暗，而改进后方法提取的DNA条带亮，且无拖带现象，证明改进后的方法提取的DNA浓度更大，纯度更高。