阴沟肠杆菌多种血清型特异引物及多重PCR检测方法

    公开(公告)号:CN110295240B

    公开(公告)日:2023-01-24

    申请号:CN201910623826.6

    申请日:2019-07-11

    Abstract: 本发明提供了用于检测阴沟肠杆菌共26个O抗原血清型的特异寡核苷酸序列及其应用,所述寡核苷酸包括:(1)阴沟肠杆菌O1型、O3‑O22型、O24型、O26‑O27型、O30型的wzy基因中各自选取的2段DNA片段,如SEQ ID NO:1至SEQ ID NO:46所示;(2)阴沟肠杆菌O23型的wzt基因中选取的2段DNA片段,如SEQ ID NO:47和SEQ ID NO:48所示。本发明还建立了一套利用上述寡核苷酸,检测阴沟肠杆菌26个O抗原血清型的多重PCR检测系统及检测方法,首次建立了利用分子生物学手段对阴沟肠杆菌进行血清学分型技术,对于这一重要致病菌的临床检测和流行病学监测具有重要意义。

    一种检测阴沟肠杆菌O21型的引物及方法

    公开(公告)号:CN106609305A

    公开(公告)日:2017-05-03

    申请号:CN201510713266.5

    申请日:2015-10-27

    Inventor: 李雅玥 王晓彤

    Abstract: 本发明公开一种检测阴沟肠杆菌O21型的引物及方法,包括正向引物5’—TGTCTTGACCGCCTAT—3’和反向引物5’—AAACCGAATGATAAGC—3’。在进行使用时,提取样品DNA并利用引物进行PCR法扩增,以1%琼脂糖凝胶电泳检测扩增产物。采用本发明的检测方法检测阴沟肠杆菌O21型所需时间短、特异性强、灵敏度高。本发明避免了采用传统鉴定方法操作繁琐、耗时长、准确性低、检出率低等缺点。

    一种检测阴沟肠杆菌O21型的引物及方法

    公开(公告)号:CN106609305B

    公开(公告)日:2020-02-28

    申请号:CN201510713266.5

    申请日:2015-10-27

    Inventor: 李雅玥 王晓彤

    Abstract: 本发明公开一种检测阴沟肠杆菌O21型的引物及方法,包括正向引物5’—TGTCTTGACCGCCTAT—3’和反向引物5’—AAACCGAATGATAAGC—3’。在进行使用时,提取样品DNA并利用引物进行PCR法扩增,以1%琼脂糖凝胶电泳检测扩增产物。采用本发明的检测方法检测阴沟肠杆菌O21型所需时间短、特异性强、灵敏度高。本发明避免了采用传统鉴定方法操作繁琐、耗时长、准确性低、检出率低等缺点。

    一种检测阴沟肠杆菌O12型的引物及方法

    公开(公告)号:CN106609304B

    公开(公告)日:2020-02-28

    申请号:CN201510711628.7

    申请日:2015-10-27

    Abstract: 本发明公开一种检测阴沟肠杆菌O12型的引物及方法,由正向引物5’—CGTTCGCAGAATACAGAG—3’和反向引物5’—TCAAAGCAAACAGGGAGT—3’组成。提取待检测样品的DNA,利用引物进行PCR扩增,将扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳检测。采用本发明的检测方法检测阴沟肠杆菌O21型所需时间短、特异性强、灵敏度高,避免了采用传统鉴定方法操作繁琐、耗时长、准确性低、检出率低等缺点。

    一种检测阴沟肠杆菌O20型的引物及方法

    公开(公告)号:CN106609303B

    公开(公告)日:2020-02-28

    申请号:CN201510708360.1

    申请日:2015-10-27

    Abstract: 本发明公开一种检测阴沟肠杆菌O20型的引物及方法,引物为两组核苷酸序列之一,第一组核苷酸序列的正向引物5’—AGAATCTTACACTGGCTTA—3’;反向引物5’—CTTAATACACCTGGCACA—3’;第二组核苷酸序列的正向引物5’—TTTGGCTATGGCCGTATT—3’;反向引物5’—GTGCAGATGCCTGATGAA—3’。在进行检测时,提取待检测样品的DNA,利用第一组核苷酸序列或者第二核苷酸序列作为引物进行PCR扩增,将扩增产物进行电泳检测。本发明避免采用传统鉴定方法缺点,检测阴沟肠杆菌O20型时间短、特异性强、灵敏度高。

    阴沟肠杆菌多种血清型特异引物及多重PCR检测方法

    公开(公告)号:CN110295240A

    公开(公告)日:2019-10-01

    申请号:CN201910623826.6

    申请日:2019-07-11

    Abstract: 本发明提供了用于检测阴沟肠杆菌共26个O抗原血清型的特异寡核苷酸序列及其应用,所述寡核苷酸包括:(1)阴沟肠杆菌O1型、O3-O22型、O24型、O26-O27型、O30型的wzy基因中各自选取的2段DNA片段,如SEQ ID NO:1至SEQ ID NO:46所示;(2)阴沟肠杆菌O23型的wzt基因中选取的2段DNA片段,如SEQ ID NO:47和SEQ ID NO:48所示。本发明还建立了一套利用上述寡核苷酸,检测阴沟肠杆菌26个O抗原血清型的多重PCR检测系统及检测方法,首次建立了利用分子生物学手段对阴沟肠杆菌进行血清学分型技术,对于这一重要致病菌的临床检测和流行病学监测具有重要意义。

    一种检测阴沟肠杆菌O12型的引物及方法

    公开(公告)号:CN106609304A

    公开(公告)日:2017-05-03

    申请号:CN201510711628.7

    申请日:2015-10-27

    Abstract: 本发明公开一种检测阴沟肠杆菌O12型的引物及方法,由正向引物5’-CGTTCGCAGAATACAGAG-3’和反向引物5’-TCAAAGCAAACAGGGAGT-3’组成。提取待检测样品的DNA,利用引物进行PCR扩增,将扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳检测。采用本发明的检测方法检测阴沟肠杆菌O21型所需时间短、特异性强、灵敏度高,避免了采用传统鉴定方法操作繁琐、耗时长、准确性低、检出率低等缺点。

    一种检测阴沟肠杆菌O20型的引物及方法

    公开(公告)号:CN106609303A

    公开(公告)日:2017-05-03

    申请号:CN201510708360.1

    申请日:2015-10-27

    Abstract: 本发明公开一种检测阴沟肠杆菌O20型的引物及方法,引物为两组核苷酸序列之一,第一组核苷酸序列的正向引物5’—AGAATCTTACACTGGCTTA—3’;反向引物5’—CTTAATACACCTGGCACA—3’;第二组核苷酸序列的正向引物5’—TTTGGCTATGGCCGTATT—3’;反向引物5’—GTGCAGATGCCTGATGAA—3’。在进行检测时,提取待检测样品的DNA,利用第一组核苷酸序列或者第二核苷酸序列作为引物进行PCR扩增,将扩增产物进行电泳检测。本发明避免采用传统鉴定方法缺点,检测阴沟肠杆菌O20型时间短、特异性强、灵敏度高。

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