公开(公告)号：CN117929716A

公开(公告)日：2024-04-26

申请号：CN202311873568.X

申请日：2023-12-29

Applicant: 大连理工大学

Inventor： 程昉 ,  杨贺晴 ,  李军荣 ,  涂阳 ,  梁为栋 ,  靳琳 ,  张立军

IPC: G01N33/543 ,  G01N33/53 ,  G01N33/535 ,  G01N21/64

Abstract: 本发明公开了一种基于单分子阵列免疫分析仪的内毒素检测方法，方法为：1)对羧基磁珠表面羧基进行活化，与靶向肽进行偶联，形成靶向肽包被磁珠；2)加入封闭液进行封闭；3)加入内毒素进行孵育；4)加入生物素化检测肽进行孵育；5)加入链霉亲和素‑β‑半乳糖苷酶进行孵育；6)将样品载入深孔板，加入试卤灵‑β‑D‑半乳糖吡喃糖苷，使用单分子阵列免疫分析仪进行检测。该方法通过形成“靶向肽包被磁珠‑内毒素‑生物素化检测肽‑链霉亲和素‑β‑半乳糖苷酶”复合物体系，经酶促反应产生荧光，通过统计荧光增长值得到内毒素浓度。上述体系的检测范围为０～200pg/mL，检测限为0.2pg/mL，实现了无需鲎试剂、操作简单且成本较低的内毒素检测。