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公开(公告)号:CN115678962A
公开(公告)日:2023-02-03
申请号:CN202211180407.8
申请日:2022-09-27
Applicant: 复旦大学附属眼耳鼻喉科医院
IPC: C12Q1/6806 , C40B50/06
Abstract: 本发明涉及一种适用于微量眼内液样本cfDNA测序的核酸抽提方法,包括以下步骤:从眼内液提取cfDNA,对样本中的核酸量进行质控,然后对质控不通过的样本进行DNA片段化处理,最后建立测序文库。本方法是对现有cfDNA抽提技术进行改良,在进行DNA片段化处理时,采用的试剂盒为KAPA HyperPlusKit,DNA片段化处理过程中的裂解时间为25min,并且在裂解完成后新增了磁珠法纯化cfDNA,从而避免DNA裂解酶的过度裂解所导致的DNA样本损失,使之可以应用于微量眼内液标本从而获取足够DNA进行cfDNA测序检测,并使之可不受长链DNA与基因组DNA的影响。