公开(公告)号：CN113046453B

公开(公告)日：2023-02-03

申请号：CN202110312647.8

申请日：2021-03-24

Applicant: 复旦大学

Inventor： 张童 ,  隋国栋 ,  赵望 ,  赵伟 ,  戴瑞雪 ,  刘思秀

IPC: C12Q1/689 ,  C12Q1/6844 ,  C12Q1/04 ,  C12N15/11 ,  C12R1/35

Abstract: 本发明公开了一种基于锁式探针介导的茎环连接的扩增技术检测DNA点突变的方法及试剂盒。本方法首先将锁式探针和DNA模板连接形成带有茎环结构的长串联重复序列片段，然后将该产物和茎环引物、滚环引物、等温扩增引物混合在一起，构造双茎环扩增元件进行指数扩增，达到信号的指数放大。其中，锁式探针包括正常型锁式探针和突变型锁式探针，将突变位点设计在突变型锁式探针的3’末端，可以很好的区分突变模板和正常模板。本发明通过采用SYBR I来进行实时荧光检测，信号明显，实现了双链点突变的快速检测，且具有很高的灵敏度和准确性，给与临床指导用药带来益处。

公开(公告)号：CN113046453A

公开(公告)日：2021-06-29

申请号：CN202110312647.8

申请日：2021-03-24

Applicant: 复旦大学

Inventor： 张童 ,  隋国栋 ,  赵望 ,  赵伟 ,  戴瑞雪 ,  刘思秀

IPC: C12Q1/689 ,  C12Q1/6844 ,  C12Q1/04 ,  C12N15/11 ,  C12R1/35

Abstract: 本发明公开了一种基于锁式探针介导的茎环连接的扩增技术检测DNA点突变的方法及试剂盒。本方法首先将锁式探针和DNA模板连接形成带有茎环结构的长串联重复序列片段，然后将该产物和茎环引物、滚环引物、等温扩增引物混合在一起，构造双茎环扩增元件进行指数扩增，达到信号的指数放大。其中，锁式探针包括正常型锁式探针和突变型锁式探针，将突变位点设计在突变型锁式探针的3’末端，可以很好的区分突变模板和正常模板。本发明通过采用SYBR I来进行实时荧光检测，信号明显，实现了双链点突变的快速检测，且具有很高的灵敏度和准确性，给与临床指导用药带来益处。