公开(公告)号：CN102286616A

公开(公告)日：2011-12-21

申请号：CN201110192114.7

申请日：2011-07-11

Applicant: 复旦大学

Inventor： 李瑶 ,  张舒林 ,  彭劲甫 ,  吴海 ,  温子禄

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/04 ,  C12N15/11 ,  G01N21/64

Abstract: 本发明属于生物医药体外诊断试剂技术领域，具体为一种检测结核分枝杆菌异烟肼耐药基因突变的方法及试剂盒。本发明的试剂盒包括一个以荧光定量PCR技术为基础的二重聚合酶链式反应，包含针对结核分枝杆菌主要的异烟肼耐药基因核酸片段的PCR正反向扩增引物和荧光探针序列，在适合的PCR条件下可在一个反应管中同时检测katG基因315位和inhA基因-15位的突变情况。本发明方法可以简便快速地在临床样品中检测结核分枝杆菌异烟肼耐药基因突变，可应用于结核分枝杆菌的分子耐药诊断。

公开(公告)号：CN103602737B

公开(公告)日：2017-01-04

申请号：CN201310557556.6

申请日：2013-11-11

Applicant: 复旦大学 ,  深圳市浩鼎生物科技有限公司

Inventor： 李瑶 ,  彭劲甫 ,  骆子义 ,  吴海 ,  姜丽娟

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/04 ,  C12R1/32

Abstract: 本发明属于生物工程检测技术领域，具体为一种结核分枝杆菌RNA/DNA同步定量分析方法。本发明包括如下步骤：结核分枝杆菌特异性定量PCR和RT-qPCR引物和探针设计；标准DNA的克隆和质粒改造；细菌RNA与DNA的同时抽提；在同一反应管中同时进行RT-qPCR和PCR；荧光定量PCR检测方法的建立和优化。利用本发明的方法可以实现对结核分支杆菌的快速定量检测，并确定细菌的生长活性状态。本发明方法简单、灵敏度高、特异性强，解决了现有检测方法中检测周期长、阳性率低、不能区分细菌的生长状态的问题，对基础研究、临床快速诊断，及药物开发和药物使用效果的临床评价具有重要的实际意义。

公开(公告)号：CN103602737A

公开(公告)日：2014-02-26

申请号：CN201310557556.6

申请日：2013-11-11

Applicant: 复旦大学 ,  深圳市浩鼎生物科技有限公司

Inventor： 李瑶 ,  彭劲甫 ,  骆子义 ,  吴海 ,  姜丽娟

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/04 ,  C12R1/32

Abstract: 本发明属于生物工程检测技术领域，具体为一种结核分枝杆菌RNA/DNA同步定量分析方法。本发明包括如下步骤：结核分枝杆菌特异性定量PCR和RT-qPCR引物和探针设计；标准DNA的克隆和质粒改造；细菌RNA与DNA的同时抽提；在同一反应管中同时进行RT-qPCR和PCR；荧光定量PCR检测方法的建立和优化。利用本发明的方法可以实现对结核分支杆菌的快速定量检测，并确定细菌的生长活性状态。本发明方法简单、灵敏度高、特异性强，解决了现有检测方法中检测周期长、阳性率低、不能区分细菌的生长状态的问题，对基础研究、临床快速诊断，及药物开发和药物使用效果的临床评价具有重要的实际意义。