公开(公告)号：CN101985665A

公开(公告)日：2011-03-16

申请号：CN201010542857.8

申请日：2010-11-12

Applicant: 复旦大学 ,  联合基因(上海)健康管理服务有限公司

Inventor： 陈沁 ,  姜丽娟 ,  肖海潮 ,  李瑶 ,  裘敏燕

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/68 ,  C12N15/11 ,  G01N21/64

CPC classification number: Y02A50/451

Abstract: 本发明属于生物芯片和诊断试剂技术领域，具体公开了一种检测多种呼吸道病毒的方法及其引物与探针。本发明对腺病毒、人偏肺病毒、流感病毒A型、流感病毒B型、呼吸道合胞病毒、博卡病毒、鼻病毒、冠状病毒（HKU1、NL63和SARS）、副流感病毒（I型、II型、III型和IV型）共14种呼吸道病毒核酸序列进行分析，设计相应的反转录引物、PCR引物和特异性探针；以反转录和多重不对称PCR的方法扩增特定基因片段；采用液相芯片技术将偶联有病毒特异性探针的荧光编码微球组与PCR扩增产物温育杂交，最后用Bio-PlexTM200进行检测。本发明的检测方法具有通量大，特异性及灵敏度高，结果稳定，重复性好，且操作简单，检测速度快。

公开(公告)号：CN101974630A

公开(公告)日：2011-02-16

申请号：CN201010522800.1

申请日：2010-10-28

Applicant: 复旦大学

Inventor： 姜丽娟 ,  李瑶 ,  吴伟

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/06 ,  C12N15/11 ,  G01N21/64

Abstract: 本发明属于生物工程检测技术领域，具体为一种结核分枝杆菌复合群的荧光定量RT-PCR检测方法。本发明包括如下步骤：结核分枝杆菌复合群特异性定量RT-PCR引物和探针设计；标准分子的构建；细菌样本RNA与DNA的共同提取；对同一份样本分别进行RT-PCR和PCR；荧光定量PCR检测方法的建立和优化。用本发明的方法检测结核分支杆菌复合群具有快速简单、灵敏度高、特异性强、且能区分死菌与活菌的优点，解决了现有检测方法中检测周期长、阳性率低、不能区分死活菌的不足，具有重要的的实际应用价值。

公开(公告)号：CN101985665B

公开(公告)日：2013-11-06

申请号：CN201010542857.8

申请日：2010-11-12

Applicant: 复旦大学 ,  联合基因(上海)健康管理服务有限公司

Inventor： 陈沁 ,  姜丽娟 ,  肖海潮 ,  李瑶 ,  裘敏燕

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/68 ,  C12N15/11 ,  G01N21/64

CPC classification number: Y02A50/451

Abstract: 本发明属于生物芯片和诊断试剂技术领域，具体公开了一种检测多种呼吸道病毒的方法及其引物与探针。本发明对腺病毒、人偏肺病毒、流感病毒A型、流感病毒B型、呼吸道合胞病毒、博卡病毒、鼻病毒、冠状病毒（HKU1、NL63和SARS）、副流感病毒（I型、II型、III型和IV型）共14种呼吸道病毒核酸序列进行分析，设计相应的反转录引物、PCR引物和特异性探针；以反转录和多重不对称PCR的方法扩增特定基因片段；采用液相芯片技术将偶联有病毒特异性探针的荧光编码微球组与PCR扩增产物温育杂交，最后用Bio-Plex??200进行检测。本发明的检测方法具有通量大，特异性及灵敏度高，结果稳定，重复性好，且操作简单，检测速度快。

公开(公告)号：CN103602737B

公开(公告)日：2017-01-04

申请号：CN201310557556.6

申请日：2013-11-11

Applicant: 复旦大学 ,  深圳市浩鼎生物科技有限公司

Inventor： 李瑶 ,  彭劲甫 ,  骆子义 ,  吴海 ,  姜丽娟

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/04 ,  C12R1/32

Abstract: 本发明属于生物工程检测技术领域，具体为一种结核分枝杆菌RNA/DNA同步定量分析方法。本发明包括如下步骤：结核分枝杆菌特异性定量PCR和RT-qPCR引物和探针设计；标准DNA的克隆和质粒改造；细菌RNA与DNA的同时抽提；在同一反应管中同时进行RT-qPCR和PCR；荧光定量PCR检测方法的建立和优化。利用本发明的方法可以实现对结核分支杆菌的快速定量检测，并确定细菌的生长活性状态。本发明方法简单、灵敏度高、特异性强，解决了现有检测方法中检测周期长、阳性率低、不能区分细菌的生长状态的问题，对基础研究、临床快速诊断，及药物开发和药物使用效果的临床评价具有重要的实际意义。

公开(公告)号：CN103602737A

公开(公告)日：2014-02-26

申请号：CN201310557556.6

申请日：2013-11-11

Applicant: 复旦大学 ,  深圳市浩鼎生物科技有限公司

Inventor： 李瑶 ,  彭劲甫 ,  骆子义 ,  吴海 ,  姜丽娟

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/04 ,  C12R1/32

Abstract: 本发明属于生物工程检测技术领域，具体为一种结核分枝杆菌RNA/DNA同步定量分析方法。本发明包括如下步骤：结核分枝杆菌特异性定量PCR和RT-qPCR引物和探针设计；标准DNA的克隆和质粒改造；细菌RNA与DNA的同时抽提；在同一反应管中同时进行RT-qPCR和PCR；荧光定量PCR检测方法的建立和优化。利用本发明的方法可以实现对结核分支杆菌的快速定量检测，并确定细菌的生长活性状态。本发明方法简单、灵敏度高、特异性强，解决了现有检测方法中检测周期长、阳性率低、不能区分细菌的生长状态的问题，对基础研究、临床快速诊断，及药物开发和药物使用效果的临床评价具有重要的实际意义。