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公开(公告)号：CN114058592A
公开(公告)日：2022-02-18
申请号：CN202111366012.2
申请日：2021-11-16
Applicant: 四川农业大学
IPC: C12N5/10 , C12N15/867 , C12N15/54 , C12N15/38 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种永生化牦牛瘤胃上皮细胞系及其构建方法，所述细胞系保藏编号为：CCTCC NO.C2021245，分类命名为：永生化牦牛瘤胃上皮细胞系SV40T‑YREC‑hTERT。本发明将原代牦牛瘤胃上皮乳头Ⅰ型胶原酶消化后的组织贴壁培养出原代瘤胃上皮细胞，以此细胞为宿主细胞，用携带SV40T和hTERT基因的慢病毒感染细胞，经筛选扩大培养后获得永生化牦牛瘤胃上皮细胞系，该细胞系的建立解决了原代瘤胃上皮细胞培养难、传代次数有限的缺陷，丰富了牦牛源细胞系资源；它能稳定传代，可保持原代瘤胃上皮细胞的形态特征且功能正常，为研究瘤胃上皮营养消化吸收代谢，细胞信号通路机制等提供了有用的体外细胞模型。
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公开(公告)号：CN113717932A
公开(公告)日：2021-11-30
申请号：CN202111085609.X
申请日：2021-09-16
Applicant: 四川农业大学
IPC: C12N5/077
Abstract: 本发明公开了一种成年牦牛肌内前体脂肪细胞原代分离培养及诱导分化方法，包括消毒处理分割、消化、筛滤、离心、纯化和培养；本发明提供的成年牦牛肌内前体脂肪细胞培养方法，不仅能够节省人力物力，还打破了传统培养方法使用初生牛犊脂肪组织和原代细胞高污染率的局限，使样品来源途径更加广泛，并能同时获取大量细胞，是一种便捷，高效的前体脂肪细胞培养方法，为后续深入研究肌内前体脂肪细胞增殖分化过程基因、蛋白表达、信号通路等提供分子基础，为研究不同部位脂肪沉积、脂肪代谢和脂肪动员等提供新思路和新方法，对改善牦牛肉质品质具有重要意义。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN112458040B
公开(公告)日：2022-07-05
申请号：CN202011533329.6
申请日：2020-12-23
Applicant: 四川农业大学
Abstract: 本发明公开了一种成年牦牛瘤胃上皮细胞的分离培养方法，采集成年牦牛瘤胃上皮组织，用70％无水乙醇清洗干净，利用Ⅰ型胶原酶和胰蛋白酶结合分步消化组织；通过尼龙滤网过滤收集细胞滤液加入含有10%胎牛血清的MEM培养液终止消化；清洗收集的细胞沉淀；使用低糖DMEM完全培养基重悬细胞后接种于培养瓶中培养；差速贴壁法和相差消化法去除成纤维细胞，获得成年牦牛瘤胃上皮细胞。按照本发明提供的方法能够成功分离出成年牦牛瘤胃上皮细胞，获得贴壁生长快，活力较高稳定传代的细胞。本发明能够为牦牛瘤胃上皮生理调控和营养吸收机制提供试验细胞模型。
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公开(公告)号：CN114058592B
公开(公告)日：2023-07-04
申请号：CN202111366012.2
申请日：2021-11-16
Applicant: 四川农业大学
IPC: C12N5/10 , C12N15/867 , C12N15/54 , C12N15/38 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种永生化牦牛瘤胃上皮细胞系及其构建方法，所述细胞系保藏编号为：CCTCC NO. C2021245，分类命名为：永生化牦牛瘤胃上皮细胞系SV40T‑YREC‑hTERT。本发明将原代牦牛瘤胃上皮乳头Ⅰ型胶原酶消化后的组织贴壁培养出原代瘤胃上皮细胞，以此细胞为宿主细胞，用携带SV40T和hTERT基因的慢病毒感染细胞，经筛选扩大培养后获得永生化牦牛瘤胃上皮细胞系，该细胞系的建立解决了原代瘤胃上皮细胞培养难、传代次数有限的缺陷，丰富了牦牛源细胞系资源；它能稳定传代，可保持原代瘤胃上皮细胞的形态特征且功能正常，为研究瘤胃上皮营养消化吸收代谢，细胞信号通路机制等提供了有用的体外细胞模型。
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公开(公告)号：CN114891734A
公开(公告)日：2022-08-12
申请号：CN202210621631.X
申请日：2022-06-02
Applicant: 四川农业大学
IPC: C12N5/077 , C12N15/867 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种永生化的牦牛瘤胃成纤维细胞系及其构建和应用。采用胰蛋白酶与分散酶消化牦牛瘤胃上皮组织，获得原代牦牛瘤胃成纤维细胞，采用携带SV40T的慢病毒感染原代成纤维细胞，再用嘌呤毒素筛选出稳定转入SV40T基因的永生化牦牛瘤胃成纤维细胞系并保种。该细胞系保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCCNO.C2021253。该细胞系的建立解决了原代瘤胃成纤维细胞培养难、传代次数有限的缺陷，丰富了牦牛源细胞系库，填补了牦牛成纤维细胞相关研究试验材料的空白，也为牦牛成纤维细胞系诱导分化成为牦牛脂肪细胞、成骨细胞等提供细胞模型，也可为生命科学相关领域以及疫苗生产等科研研究提供主要原材料。
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公开(公告)号：CN113717932B
公开(公告)日：2023-03-14
申请号：CN202111085609.X
申请日：2021-09-16
Applicant: 四川农业大学
IPC: C12N5/077
Abstract: 本发明公开了一种成年牦牛肌内前体脂肪细胞原代分离培养及诱导分化方法，包括消毒处理分割、消化、筛滤、离心、纯化和培养；本发明提供的成年牦牛肌内前体脂肪细胞培养方法，不仅能够节省人力物力，还打破了传统培养方法使用初生牛犊脂肪组织和原代细胞高污染率的局限，使样品来源途径更加广泛，并能同时获取大量细胞，是一种便捷，高效的前体脂肪细胞培养方法，为后续深入研究肌内前体脂肪细胞增殖分化过程基因、蛋白表达、信号通路等提供分子基础，为研究不同部位脂肪沉积、脂肪代谢和脂肪动员等提供新思路和新方法，对改善牦牛肉质品质具有重要意义。
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公开(公告)号：CN112458040A
公开(公告)日：2021-03-09
申请号：CN202011533329.6
申请日：2020-12-23
Applicant: 四川农业大学
Abstract: 本发明公开了一种成年牦牛瘤胃上皮细胞的分离培养方法，采集成年牦牛瘤胃上皮组织，用70％无水乙醇清洗干净，利用Ⅰ型胶原酶和胰蛋白酶结合分步消化组织；通过尼龙滤网过滤收集细胞滤液加入含有10%胎牛血清的MEM培养液终止消化；清洗收集的细胞沉淀；使用低糖DMEM完全培养基重悬细胞后接种于培养瓶中培养；差速贴壁法和相差消化法去除成纤维细胞，获得成年牦牛瘤胃上皮细胞。按照本发明提供的方法能够成功分离出成年牦牛瘤胃上皮细胞，获得贴壁生长快，活力较高稳定传代的细胞。本发明能够为牦牛瘤胃上皮生理调控和营养吸收机制提供试验细胞模型。
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