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1.

发明公开
一种利用酚氯仿法纯化RNA的方法无效

公开(公告)号：CN114891782A

公开(公告)日：2022-08-12

申请号：CN202210569028.1

申请日：2022-05-24

Applicant: 四川农业大学

Inventor： 贺力 , 王宁 , 李恒宽 , 王梽名 , 张林珍 , 熊筱萱

IPC: C12N15/10

Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，公开了一种利用酚氯仿法纯化RNA的方法，通过酚氯仿法优化实验步骤，通过变性作用抑制RNaseA和DNaseI活性，除去RNaseA和DNaseI后获得纯化的RNA双链。具体包括：利用Trizol试剂提取总RNA；添加DNaseI试剂去除基因组DNA；在反应体系中加入RNaseA去除单链RNA；利用酚氯仿法纯化dsRNA；对dsRNA进行反转录反应；设计特异性引物并进行PCR扩增；琼脂糖凝胶电泳。本发明通过酚氯仿法优化实验步骤，通过变性作用抑制RNaseA和DNaseI活性，避免反转录和RT‑PCR过程中RNA降解、cDNA/DNA产物降解的影响。

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