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公开(公告)号:CN110804648A
公开(公告)日:2020-02-18
申请号:CN201911009026.1
申请日:2019-10-23
Applicant: 同济大学
IPC: C12Q1/6841 , C12Q1/06
Abstract: 本发明提供了一种检测黑茶发酵过程中微生物结构变化的方法,其包括:将黑茶进行细胞固定,得到固定后的黑茶;将固定后的黑茶进行超声、过滤,加入琼脂糖,封膜后得到第一滤膜;杂交缓冲液和寡核苷酸探针混合,得到第一混合液,将第一混合液和第一滤膜混合并离心,得到第二滤膜;酪胺标记的荧光染料、信号增强缓冲液和双氧水混合,得到第二混合液,将第二混合液和第二滤膜进行处理,计算得到黑茶中微生物的数量;本发明使用辣根过氧化物酶标记寡核苷酸分子,通过酶活反应将荧光分子大量结合到目标DNA周围,大幅度提高了检测灵敏度,对一些丰度很低且存在风险的微生物,能够快速检出,保证了黑茶生产过程中的安全性,并降低了背景荧光。