公开(公告)号：CN107245517A

公开(公告)日：2017-10-13

申请号：CN201710408300.7

申请日：2017-06-02

Applicant: 合肥市第六中学 ,  安徽省农业科学院植物保护与农产品质量安全研究所

Inventor： 戚竞文 ,  赵伟 ,  鲍康胜 ,  迟元凯 ,  陈晴晴 ,  汪涛 ,  严丹侃

IPC: C12Q1/68 ,  C12Q1/04 ,  C12N15/11 ,  C12R1/645

CPC classification number: C12Q1/6895 ,  C12Q1/6844 ,  C12Q2531/119

Abstract: 本发明属于基因工程领域，具体公开了一种用于检测大豆拟茎点种腐病菌的LAMP引物、试剂盒及其应用。大豆拟茎点种腐病菌的LAMP检测靶标序列为钙调素(Calmodulin,CaM)编码基因及引物组FIP、BIP、F3、B3，并形成检测混合溶液，加入2μL待检测DNA溶液并将反应体系定容至总体积25μL，恒温反应62°C，60 min，反应结束后加入0.25μL SYBR Green I作为显色反应指示剂。阳性反应溶液变为黄绿色，紫外灯下可以观察到荧光，表示存在大豆拟茎点种腐病菌，阴性反应溶液没有出现颜色变化，仍为橙色，紫外灯下不发荧光，表示不存在大豆拟茎点种腐病菌，或所含大豆拟茎点种腐病菌未达到最低检测量。本发明具有更高的准确性、灵敏度和时效性。