PcDNA3.1(+)-Fbw7重组质粒及其构建方法与应用

    公开(公告)号:CN103352051B

    公开(公告)日:2015-09-23

    申请号:CN201310319435.8

    申请日:2013-07-26

    Inventor: 李文岗 谷乐 郭跃

    Abstract: PcDNA3.1(+)-Fbw7重组质粒及其构建方法与应用,涉及一种重组质粒。所述构建方法:1)将PSG5-Myc-Fbw7质粒谱图信息与PcDNA3.1(+)质粒谱图信息比较,确定双酶切位点EcoR Ⅰ和NotⅠ;2)双酶切PSG5-Myc-Fbw7质粒;3)双酶切PcDNA3.1(+)质粒载体;4)通过琼脂糖凝胶电泳鉴定双酶切效率,将质粒载体PcDNA3.1(+)和目的基因Fbw7全长进行连接;5)将重组质粒转化感受态细菌,筛选阳性克隆,并进行测序鉴定,抽提PcDNA3.1(+)-Fbw7重组质粒。所述PcDNA3.1(+)-Fbw7重组质粒可用于制备治疗人胆管癌肿瘤药物。

    PcDNA3.1(+)-Fbw7重组质粒及其构建方法与应用

    公开(公告)号:CN103352051A

    公开(公告)日:2013-10-16

    申请号:CN201310319435.8

    申请日:2013-07-26

    Inventor: 李文岗 谷乐 郭跃

    Abstract: PcDNA3.1(+)-Fbw7重组质粒及其构建方法与应用,涉及一种重组质粒。所述构建方法:1)将PSG5-Myc-Fbw7质粒谱图信息与PcDNA3.1(+)质粒谱图信息比较,确定双酶切位点EcoR Ⅰ和NotⅠ;2)双酶切PSG5-Myc-Fbw7质粒;3)双酶切PcDNA3.1(+)质粒载体;4)通过琼脂糖凝胶电泳鉴定双酶切效率,将质粒载体PcDNA3.1(+)和目的基因Fbw7全长进行连接;5)将重组质粒转化感受态细菌,筛选阳性克隆,并进行测序鉴定,抽提PcDNA3.1(+)-Fbw7重组质粒。所述PcDNA3.1(+)-Fbw7重组质粒可用于制备治疗人胆管癌肿瘤药物。

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