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公开(公告)号：CN116926060A
公开(公告)日：2023-10-24
申请号：CN202310652836.9
申请日：2023-06-02
Applicant: 厦门大学
Abstract: 本发明提供一种蛋白质定向进化的方法，包括：1)构建筛选质粒，所述筛选质粒的结构为luxpR启动子1‑核糖体结合位点‑luxR‑终止子‑luxpR蛋白基因‑核糖体结合位点‑细菌裂解蛋白基因lysis‑终止子‑luxpR启动子2‑核糖体结合位点‑目的蛋白基因‑终止子；2)采用易错PCR扩增目的蛋白基因得易错PCR产物；3)通过酶连反应将筛选质粒和易错PCR的产物连接，构建重组质粒；4)将重组质粒转化感受态细胞，涂布至含有目的蛋白基因的底物和抗生素的平板上，培养一段时间，筛选出含目的蛋白基因的突变株；5)对筛选出的含目的蛋白基因的突变株表达的突变蛋白进行测序，获得突变蛋白的序列。本发明的方法极大程度减少了蛋白质筛选工作时间和工作量。
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