公开(公告)号：CN104805098B

公开(公告)日：2017-08-08

申请号：CN201510264312.8

申请日：2015-05-22

Applicant: 厦门大学

Inventor： 赵晶 ,  曲武

IPC: C12N15/53 ,  C12N9/08 ,  C12N15/70 ,  A62D3/02 ,  A62D101/26

Abstract: 源于红树林沉积物的可降解孔雀石绿的过氧化物酶及制备，涉及一种过氧化物酶，过氧化物酶基因来自红树林沉积物微生物宏基因组序列。克隆过氧化物酶基因，再插入表达载体，构建携带过氧化物酶的重组表达载体；将重组表达载体转化到E.coli BL21(DE3)中；选取转化后E.coli BL21(DE3)中的阳性克隆于培养基中发酵培养；离心收集发酵后的E.coli BL21(DE3)细胞，重悬E.coli BL21(DE3)细胞于裂解缓冲液中裂解，离心，收集上清液，再与预先结合NiSO4的R10‑Flammable混匀，咪唑洗脱，得过氧化物Mgv‑rPOD。所得过氧化物酶对孔雀石绿具有显著降解活性。

公开(公告)号：CN104403969A

公开(公告)日：2015-03-11

申请号：CN201410690568.0

申请日：2014-11-26

Applicant: 厦门大学

Inventor： 赵晶 ,  曲武 ,  王德祥

IPC: C12N1/20 ,  C12N9/08 ,  C12N15/53 ,  C12N15/70 ,  A62D3/02 ,  A62D101/26

CPC classification number: C12R1/01 ,  A62D3/02 ,  A62D2101/26 ,  C12N9/0065

Abstract: 一种可降解孔雀石绿的过氧化物酶及其制备方法，涉及过氧化物酶。嗜中温黏着杆菌HMG1，编号为CGMCC No.9835。克隆过氧化物酶基因peroxidase；将过氧化物酶基因插入表达载体，构建携带氧化物酶基因的重组表达载体；将重组表达载体转化到E.coli BL21中；选取转化后E.coli BL21中的阳性克隆于培养基中进行发酵培养；离心收集发酵后的E.coli BL21细胞，重悬E.coli BL21细胞于裂解缓冲液中进行裂解；将裂解后的悬液进行离心，收集上清液；将上清液与预先与NiSO4结合的R10-Flammable混匀，用浓度梯度咪唑进行洗脱，即得。

公开(公告)号：CN104805098A

公开(公告)日：2015-07-29

申请号：CN201510264312.8

申请日：2015-05-22

Applicant: 厦门大学

Inventor： 赵晶 ,  曲武

IPC: C12N15/53 ,  C12N9/08 ,  C12N15/70 ,  A62D3/02 ,  A62D101/26

Abstract: 源于红树林沉积物的可降解孔雀石绿的过氧化物酶及制备，涉及一种过氧化物酶，过氧化物酶基因来自红树林沉积物微生物宏基因组序列。克隆过氧化物酶基因，再插入表达载体，构建携带过氧化物酶的重组表达载体；将重组表达载体转化到E.coli BL21(DE3)中；选取转化后E.coli BL21(DE3)中的阳性克隆于培养基中发酵培养；离心收集发酵后的E.coli BL21(DE3)细胞，重悬E.coli BL21(DE3)细胞于裂解缓冲液中裂解，离心，收集上清液，再与预先结合NiSO4的R10-Flammable混匀，咪唑洗脱，得过氧化物Mgv-rPOD。所得过氧化物酶对孔雀石绿具有显著降解活性。