公开(公告)号：CN118325900A

公开(公告)日：2024-07-12

申请号：CN202410527215.2

申请日：2024-04-29

Applicant: 南昌大学第二附属医院

Inventor： 黄凯 ,  刘俊哲 ,  李婧滢 ,  祝新根

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/66 ,  C12N15/867 ,  C12N7/01 ,  C07K14/435 ,  C12N15/12 ,  C07K19/00 ,  C12N5/10

Abstract: 本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种真核细胞内促进蛋白质翻译系统的质粒及其构建方法和应用。本发明中质粒包括SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示碱基序列的tgRNA。本发明中蛋白质过表达体系的关键质粒构建方法包括：寻找基因编码上游58bp处长度为22bp序列；将序列与BoxB序列相连之后并构建相应引物；质粒酶切形成线性化载体；引物退火后形成双链与线性化载体连接构建重组质粒。本发明通过促进翻译起始复合物形成在翻译水平促进蛋白质表达，通过不断优化该系统得出能够促进靶基因表达的最佳组合方式。