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公开(公告)号：CN101921786A
公开(公告)日：2010-12-22
申请号：CN201010237912.2
申请日：2010-07-27
Applicant: 南昌大学
Abstract: 一种珍珠蚌铜锌超氧化物歧化酶的制备方法。是通过提取一种育珠蚌褶纹冠蚌的总RNA，用反转录及PCR技术获得褶纹冠蚌铜锌超氧化物歧化酶基因的全长cDNA，将cDNA克隆到pET30载体上，转化大肠杆菌BL21(DE3)，得到重组工程菌。将工程菌在LB培养基中高密度培养，用IPTG诱导，同时在培养基中加一定浓度的Cu2+和Zn2+后，重组基因得到大量表达。产物经亲和层析柱，得到纯化的重组超氧化物歧化酶。该发明准确获得含有155个氨基酸残基的成熟蛋白序列，该酶具有抗氧化、抗衰老作用。本方法获得的菌体产量高，表达量高，活性高，产物对酸碱、温度、变性剂均很稳定，对乙醇损伤的LO-2肝细胞具有明显的保护作用，且易纯化，具有广阔的工业应用前景。
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