一种用于单个细胞外囊泡的荧光检测方法

    公开(公告)号:CN119534416A

    公开(公告)日:2025-02-28

    申请号:CN202510107757.9

    申请日:2025-01-23

    Inventor: 丁显光 余振飞

    Abstract: 本发明提供了一种用于单个细胞外囊泡的荧光检测方法,步骤如下:将LPS加到巨噬细胞中,孵育,得极化巨噬细胞;从极化巨噬细胞中提取EV;将磷脂酰胆碱溶于氯仿‑甲醇混合溶剂,旋转蒸发,得脂质体薄膜;将PBS和混合药液加到含脂质体薄膜的烧瓶中,混合,使薄膜水化;水化后脂质体经滤膜挤压、离心,收集沉淀;沉淀用pbs分散后,再次离心,取上清,得脂质体溶液;在EV中加DIL,孵育后离心,收集沉淀,用PBS重悬;取重悬液与脂质体溶液混合,孵育;用倒置荧光显微镜进行成像。本发明通过脂质体与EV囊泡的膜融合实现对囊泡内部信息的荧光检测与分析,避免采用现有方法带来的膜结构损害、内容物泄漏、操作难度大等问题。

    一种用于单个细胞外囊泡的荧光检测方法

    公开(公告)号:CN119534416B

    公开(公告)日:2025-04-11

    申请号:CN202510107757.9

    申请日:2025-01-23

    Inventor: 丁显光 余振飞

    Abstract: 本发明提供了一种用于单个细胞外囊泡的荧光检测方法,步骤如下:将LPS加到巨噬细胞中,孵育,得极化巨噬细胞;从极化巨噬细胞中提取EV;将磷脂酰胆碱溶于氯仿‑甲醇混合溶剂,旋转蒸发,得脂质体薄膜;将PBS和混合药液加到含脂质体薄膜的烧瓶中,混合,使薄膜水化;水化后脂质体经滤膜挤压、离心,收集沉淀;沉淀用pbs分散后,再次离心,取上清,得脂质体溶液;在EV中加DIL,孵育后离心,收集沉淀,用PBS重悬;取重悬液与脂质体溶液混合,孵育;用倒置荧光显微镜进行成像。本发明通过脂质体与EV囊泡的膜融合实现对囊泡内部信息的荧光检测与分析,避免采用现有方法带来的膜结构损害、内容物泄漏、操作难度大等问题。

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