公开(公告)号：CN101936999B

公开(公告)日：2013-07-17

申请号：CN201010238892.0

申请日：2010-07-28

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 吴彩娥 ,  曹福亮 ,  范龚健 ,  李婷婷 ,  李莹莹

IPC: G01N33/68 ,  G01N1/28 ,  G01N33/531

Abstract: 本发明涉及检测白果过敏蛋白的双抗体夹心ELISA方法，包括以下步骤：(1)白果蛋白提取：取白果1kg，经冻干处理后研磨，加入5～7倍体积石油醚脱脂，用pH8.5，0.15mol/LTris-HCl溶液提取白果蛋白，经冷冻离心后得到蛋白上清液，经过40％-80％饱和度的硫酸铵沉淀，再次冷冻离心，得到沉淀用0.01mol/L、pH7.4磷酸盐缓冲液溶解，并用所述磷酸盐缓冲液进行透析，透析完全后，冷冻干燥，得到白果蛋白提取物；所述白果蛋白提取物用上述磷酸盐缓冲液溶解，得到白果蛋白提取物溶液；(2)鼠源过敏原特异性抗体IgE的制备(3)双抗体夹心ELISA方法检测白果过敏蛋白。本发明能筛选白果及其制品中过敏蛋白。

公开(公告)号：CN101936999A

公开(公告)日：2011-01-05

申请号：CN201010238892.0

申请日：2010-07-28

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 吴彩娥 ,  曹福亮 ,  范龚健 ,  李婷婷 ,  李莹莹

IPC: G01N33/68 ,  G01N1/28 ,  G01N33/531

Abstract: 本发明涉及检测白果过敏蛋白的双抗体夹心ELISA方法，包括以下步骤：(1)白果蛋白提取：取白果1kg，经冻干处理后研磨，加入5～7倍体积石油醚脱脂，用pH 8.5，0.15mol/LTris-HCl溶液提取白果蛋白，经冷冻离心后得到蛋白上清液，经过40％-80％饱和度的硫酸铵沉淀，再次冷冻离心，得到沉淀用0.01mol/L、pH7.4磷酸盐缓冲液溶解，并用所述磷酸盐缓冲液进行透析，透析完全后，冷冻干燥，得到白果蛋白提取物；所述白果蛋白提取物用上述磷酸盐缓冲液溶解，得到白果蛋白提取物溶液；(2)鼠源过敏原特异性抗体IgE的制备(3)双抗体夹心ELISA方法检测白果过敏蛋白。本发明能筛选白果及其制品中过敏蛋白。