一种连接肽介导的酶固定化BaPAD催化剂及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN111662899B

    公开(公告)日:2022-12-27

    申请号:CN202010515552.1

    申请日:2020-06-08

    Inventor: 丁少军 李璐璐

    Abstract: 本发明公开了一种连接肽介导的酶固定化BaPAD催化剂及其制备方法和应用,属于催化剂的制备与应用领域。该方法首先将对沸石特异性吸附的连接肽通过Nco I/Xho I限制性酶切位点插入到含有编码酚酸脱羧酶BaPAD基因的质粒pET28a‑bapad载体上,然后通过融合酶在经过预处理的Na‑Y沸石载体上固定化得到酶固定化BaPAD催化剂,其中酚酸脱羧酶BaPAD来自萎缩芽孢杆菌。本发明所制备的生物催化剂用于催化FA生产4‑VG,和全细胞催化FA生产4‑VG相比,在相同的条件下,将4‑VG浓度和生产率提高到1.97M和22.8g/L/h;且具有很好的重复使用性,能够实现4‑VG的工业化生产需求。

    一种连接肽介导的酶固定化BaPAD催化剂及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN111662899A

    公开(公告)日:2020-09-15

    申请号:CN202010515552.1

    申请日:2020-06-08

    Inventor: 丁少军 李璐璐

    Abstract: 本发明公开了一种连接肽介导的酶固定化BaPAD催化剂及其制备方法和应用,属于催化剂的制备与应用领域。该方法首先将对沸石特异性吸附的连接肽通过Nco I/Xho I限制性酶切位点插入到含有编码酚酸脱羧酶BaPAD基因的质粒pET28a-bapad载体上,然后通过融合酶在经过预处理的Na-Y沸石载体上固定化得到酶固定化BaPAD催化剂,其中酚酸脱羧酶BaPAD来自萎缩芽孢杆菌。本发明所制备的生物催化剂用于催化FA生产4-VG,和全细胞催化FA生产4-VG相比,在相同的条件下,将4-VG浓度和生产率提高到1.97M和22.8g/L/h;且具有很好的重复使用性,能够实现4-VG的工业化生产需求。

    一种制备高浓度2-甲氧基-4-乙烯基苯酚的方法

    公开(公告)号:CN110184315A

    公开(公告)日:2019-08-30

    申请号:CN201910397024.8

    申请日:2019-05-14

    Inventor: 丁少军 李璐璐

    Abstract: 本发明公开了一种制备高浓度2-甲氧基-4-乙烯基苯酚的方法,以含有来自萎缩芽孢杆菌的酚酸脱羧酶BaPAD的重组大肠杆菌为生物催化剂,以5L生物反应器为反应容器,采用流加高浓度底物阿魏酸的方法,通过水/正辛醇两相体系制备高浓度2-甲氧基-4-乙烯基苯酚;在本发明中,2-甲氧基-4-乙烯基苯酚会选择性的进入有机相正辛醇中而阿魏酸却会保留在水相中,阿魏酸干粉既是该催化反应的底物,也可以用来调节体系的pH平衡,正辛醇是通过实验筛选出的最适用于催化阿魏酸制备2-甲氧基-4-乙烯基苯酚的有机试剂,最终2-甲氧基4-乙烯基苯酚浓度为1.6M,摩尔转化率为100%,已达到能够满足工业化生产需求的水平。

    一种制备4-乙烯基愈创木酚的方法

    公开(公告)号:CN105238821A

    公开(公告)日:2016-01-13

    申请号:CN201510748054.0

    申请日:2015-11-06

    Abstract: 本发明公开了一种制备4-乙烯基愈创木酚的方法,以地衣芽孢杆菌71722为生物催化剂,以高浓度阿魏酸为底物,通过水/有机溶剂两相体系高效制备4-乙烯基愈创木酚。本发明的制备4-乙烯基愈创木酚的方法,采用由水相和水不溶性有机溶剂组成的两相反应体系,在这个反应体系中,4-乙烯基愈创木酚会选择性的进入有机相而阿魏酸却会保留在水相中,从而提高产物的产量以及转化率。同时,地衣芽孢杆菌71722转化高浓度阿魏酸高效制备4-乙烯基愈创木酚的方法有条件温和,环境污染小,产物得率高,副产物少,生产步骤简单等优点,具有很大应用前景。

    一种制备高浓度2-甲氧基-4-乙烯基苯酚的方法

    公开(公告)号:CN110184315B

    公开(公告)日:2023-05-23

    申请号:CN201910397024.8

    申请日:2019-05-14

    Inventor: 丁少军 李璐璐

    Abstract: 本发明公开了一种制备高浓度2‑甲氧基‑4‑乙烯基苯酚的方法,以含有来自萎缩芽孢杆菌的酚酸脱羧酶BaPAD的重组大肠杆菌为生物催化剂,以5L生物反应器为反应容器,采用流加高浓度底物阿魏酸的方法,通过水/正辛醇两相体系制备高浓度2‑甲氧基‑4‑乙烯基苯酚;在本发明中,2‑甲氧基‑4‑乙烯基苯酚会选择性的进入有机相正辛醇中而阿魏酸却会保留在水相中,阿魏酸干粉既是该催化反应的底物,也可以用来调节体系的pH平衡,正辛醇是通过实验筛选出的最适用于催化阿魏酸制备2‑甲氧基‑4‑乙烯基苯酚的有机试剂,最终2‑甲氧基4‑乙烯基苯酚浓度为1.6M,摩尔转化率为100%,已达到能够满足工业化生产需求的水平。

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