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公开(公告)号：CN111116749A
公开(公告)日：2020-05-08
申请号：CN201911410030.9
申请日：2019-12-31
Applicant: 南京拂晓生物科技有限公司
Abstract: 本发明涉及生物技术领域，公开了一种重组的人源化GPC3抗体及其构建和应用。本发明重组的人源化GPC3抗体，包括重链可变区和轻链可变区，重链可变区的碱基序列为SEQUENCE NO:VH，轻链可变区碱基序列为SEQUENCE NO:VL，抗体结合人IgG1 Fc。本发明将目的基因GPC3抗体的轻链可变区碱基序列和重链可变区碱基序列嵌合到CHO-K1稳定细胞系的染色体中，构件稳定的细胞系，并能够长期稳定存在，在传代过程中不会丢失，能够稳定的表达GPC3抗体。
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公开(公告)号：CN111157725A
公开(公告)日：2020-05-15
申请号：CN202010023027.8
申请日：2020-01-09
Applicant: 南京拂晓生物科技有限公司
IPC: G01N33/574 , G01N33/543
Abstract: 一种人Legumain化学发光检测试剂盒及其应用，所述试剂盒包括以下组分：a）链霉亲和素化磁珠悬浮液；b)吖啶酯标记的Legumain抗体；c)生物素标记Legumain抗体；d）化学发光底物液，包括A液和B液，所述A液为硝酸溶液，B液为氢氧化钠溶液；e)校准品：浓度为0pg/mL，10pg/mL、50pg/mL、100pg/mL、500pg/mL、1000pg/mL、2500pg/mL的Legumain抗原；f）质控品；g)清洗液。本试剂盒以链霉亲和素化磁珠悬浮液作为免疫反应与分离的固相载体，亲和素化的磁性微粒子主要用于与生物素标记的抗体相连，通过免疫反应使其能够捕获靶物质形成免疫复合物。
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公开(公告)号：CN111122860A
公开(公告)日：2020-05-08
申请号：CN201911413726.7
申请日：2019-12-31
Applicant: 南京拂晓生物科技有限公司
IPC: G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一种检测肺炎衣原体抗体间接ELISA检测试剂盒及检测方法，检测试剂盒包括肺炎衣原体重组抗原ELISA包被酶标条、血清稀释板、稀释液、阳性对照液、阴性对照液、酶标二抗结合物、洗涤液、TMB显色液和终止液。终止液为2 M浓硫酸。CP重组抗原的序列为SEQ ID NO.1。通过方阵优化最佳抗原包被浓度和血清稀释度、确定酶标二抗稀释度、确定封闭液种类和封闭时间、抗体孵育时间。本发明用于检测CP抗体具有特异性强、敏感性高、稳定性好和通量高等优点，可以很好的而检测人体血清中CP抗体，对临床诊断具有一定的指导意义。
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公开(公告)号：CN111116749B
公开(公告)日：2023-02-17
申请号：CN201911410030.9
申请日：2019-12-31
Applicant: 南京拂晓生物科技有限公司
Abstract: 本发明涉及生物技术领域，公开了一种重组的人源化GPC3抗体及其构建和应用。本发明重组的人源化GPC3抗体，包括重链可变区和轻链可变区，重链可变区的碱基序列为SEQUENCE NO:VH，轻链可变区碱基序列为SEQUENCE NO:VL，抗体结合人IgG1 Fc。本发明将目的基因GPC3抗体的轻链可变区碱基序列和重链可变区碱基序列嵌合到CHO‑K1稳定细胞系的染色体中，构件稳定的细胞系，并能够长期稳定存在，在传代过程中不会丢失，能够稳定的表达GPC3抗体。
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公开(公告)号：CN111087453A
公开(公告)日：2020-05-01
申请号：CN201911425395.9
申请日：2019-12-31
Applicant: 南京拂晓生物科技有限公司
IPC: C07K14/295 , C12N15/70 , G01N33/68 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种肺炎衣原体重组抗原的制备方法及其应用方法，肺炎衣原体重组抗原的制备方的具体步骤如下：肺炎衣原体重组抗原序列的选取：肺炎衣原体重组抗原的原核表达；肺炎衣原体重组抗原的纯化与复性和肺炎衣原体重组抗原的验证，开发血清学检测方法的前提是制备有效的CP抗原，CP天然抗原的制备工艺繁琐、成本高及制备人员存在感染的风险，免疫原性强且特异性好的重组抗原作为天然抗原的替代品，不但降低了生产成本，而且为研制检测肺炎衣原体抗体IgG和IgM检测试剂盒打下了基础，本发明方法操作简单，成本低，且CP抗原的特异性强，稳定性好，可以大批量生产，适于推广应用。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN111040999B
公开(公告)日：2022-05-06
申请号：CN201911425714.6
申请日：2019-12-31
Applicant: 南京拂晓生物科技有限公司
Abstract: 一种稳定表达GPC3的重组CHO细胞株及其应用，CHO细胞株保藏编号为：CGMCC No.18881；所述GPC3由如SEQ ID No.1所示的cDNA序列编码；重组CHO细胞株生产的抗原用于制备GPC3单克隆抗体，重组CHO细胞株用于制备GPC3抗体。本发明中叶酸还原酶缺陷型CHO细胞缺乏内源性二氢叶酸还原酶，将含有二氢叶酸还原酶基因和目的基因的表达载体共转染，之后在二氢叶酸还原酶的竞争性抑制物—氨甲基喋呤存在的条件下，dhfr基因拷贝数的增加带动从而达到提高目的基因表达量的目的，达到构建稳定高效表达GPC3的稳定细胞系，填补这一技术空白。
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公开(公告)号：CN111751534A
公开(公告)日：2020-10-09
申请号：CN202010596422.5
申请日：2020-06-28
Applicant: 南京拂晓生物科技有限公司
IPC: G01N33/577 , G01N33/574 , C07K16/30 , C07K16/28
Abstract: 一种磷脂酰肌醇蛋白聚糖3检测试剂盒及其应用，所述试剂盒含有：（a）一抗：GPC3单克隆抗体工作液，所述GPC3单克隆抗体为鼠源GPC3抗体或人源GPC3抗体；（b）二抗：HRP标记羊抗鼠IgG抗体工作液；（c）DAB显色液A缓冲液和DAB显色液B缓冲液；（d）苏木素细胞染色液；（e）组织抗原修复液；（f）2-3％体积比的H2O2；本发明涉及的检测试剂盒具有高灵敏性，高特异性和高准确性的特点，不仅可以区分癌变组织和正常组织，还可以区分癌变组织中癌变的细胞和正常的细胞；GPC3在正常肝细胞中呈阴性表达染色，而在癌变细胞细胞浆和细胞膜中呈阳性表达，有效地区分肝癌变细胞和正常细胞，为临床的诊断和治疗提供参考依据。
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公开(公告)号：CN109694856B
公开(公告)日：2020-02-04
申请号：CN201811513406.4
申请日：2017-02-16
Applicant: 李伟 , 南京拂晓生物科技有限公司
Inventor： 李伟
IPC: C12N5/20 , C07K16/40 , G01N33/577 , G01N33/573
Abstract: 本发明公开了抗人Legumain蛋白的单克隆抗体、杂交瘤细胞株LGMN‑2及其用途。本发明所提供的杂交瘤细胞株，名称为LGMN‑2，保藏号为CGMCC NO.12995。本发明所提供的抗人Legumain蛋白的单克隆抗体，由名称为LGMN‑2，保藏号为CGMCC NO.12995的杂交瘤细胞株分泌产生。本发明的单克隆抗体具有较高的效价，间接法效价最高达1:2.56×108。本发明的单克隆抗体与Legumain同家族蛋白Cathepsin B，Cathepsin H和Cathepsin L无交叉反应，具有较好的特异性。
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公开(公告)号：CN111116730A
公开(公告)日：2020-05-08
申请号：CN201911421261.X
申请日：2019-12-31
Applicant: 南京拂晓生物科技有限公司
Abstract: 本发明提供了一种重组G-17蛋白、编码该重组蛋白的基因及其应用，所述重组G-17蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，编码所述重组G-17蛋白的基因的碱基序列如SEQ ID NO:2所示。本发明将G-17抗原表位序列通过柔性片段与胰岛素瘤相关蛋白IA-2的B细胞表位和P277的C端的Th2细胞表位的序列连接后，形成重组G-17蛋白氨基酸序列；使用所述重组G-17蛋白免疫小鼠，ELISA检测抗体滴度值达到1：106，从而实现了对G-17的特异性检测识别，既增强了检测灵敏度，又不会导致检测结果失真，为后续筛选高特异性的抗体提高了几率，节省了时间和经济成本。
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公开(公告)号：CN111089978A
公开(公告)日：2020-05-01
申请号：CN201911421239.5
申请日：2019-12-31
Applicant: 南京拂晓生物科技有限公司
IPC: G01N33/68 , G01N33/574 , G01N33/559
Abstract: 本发明公开了用于快速检测卵巢癌肿瘤标志物Legumain的胶体金免疫层析试剂盒及其制备方法,所述试剂盒包括PVC底板、样品垫、结合垫、反应垫和吸水垫，PVC底板呈矩形，样品垫和吸水垫分别对称敷设在矩形PVC底板的一组短边上，样品垫与吸水垫之间设置有反应垫，样品垫与反应垫之间还设置有结合垫；反应垫上设置有包被有胶体金标记的鼠源抗LegumainN抗体的检测线和包被有羊抗鼠IgG的质控线。胶体金作为侧向层析试剂盒标记探制备工艺成熟、性能稳定；能够增强检测结果的特异性，消除检测过程中出现的假阳性，检测结果更准确；需要检测的样本量小，适用于广大女性的卵巢癌筛查及家庭自检和床旁快速检测。
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