公开(公告)号：CN103525896B

公开(公告)日：2015-04-08

申请号：CN201310447516.6

申请日：2013-09-27

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 陈怡露 ,  徐俊 ,  韦萍 ,  陈亚利 ,  雍晓雨 ,  郑涛 ,  柏建新 ,  许琳 ,  费文斌

IPC: C12Q1/06

Abstract: 本发明公开了一种基于TTC染色法的高活力酵母细胞定量筛选方法，将待检测酵母细胞菌液涂布于平板，培养待其长出单菌落；然后接种于96孔细胞培养板各孔培养液中，培养至测定得到菌体OD值在1-3之间，离心弃上清；在96孔细胞培养板各孔中加入TTF萃取剂，震荡10-15S后离心；将震荡离心后的上清液吸取到96孔酶标板中，利用酶标仪在486nm波长下测定TTF吸收值，根据TTF标准曲线及测定的细胞OD值，计算每个孔中TTF含量，以此确定细胞活力大小。本方法筛选结果定量可靠地直接反应细胞活力，不仅能明显降低筛选时间，而且能降低操作过程中的视觉判断产生的人为错误。

公开(公告)号：CN103215301B

公开(公告)日：2014-07-09

申请号：CN201310034108.8

申请日：2013-01-29

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 陈怡露 ,  郑涛 ,  冯娇 ,  雍晓雨 ,  许琳 ,  曹琳 ,  沈海波 ,  费文斌

IPC: C12N15/78 ,  C12N1/21 ,  H01M4/90 ,  C12R1/385

Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，涉及微生物燃料电池产电基因工程菌的构建、菌株及其应用。通过分子生物学手段在铜绿假单胞菌PAO1中异源表达大肠杆菌中NAD+从头合成途径与回补途径中共同的关键基因nadE，获得产电量高的基因工程菌株铜绿假单胞菌（Pseudomonasaeruginosa）PA-nadE，应用于微生物燃料电池领域的发展，并且为产电铜绿假单胞菌的基因工程研究奠定了良好的基础。

公开(公告)号：CN103525896A

公开(公告)日：2014-01-22

申请号：CN201310447516.6

申请日：2013-09-27

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 陈怡露 ,  徐俊 ,  韦萍 ,  陈亚利 ,  雍晓雨 ,  郑涛 ,  柏建新 ,  许琳 ,  费文斌

IPC: C12Q1/06

Abstract: 本发明公开了一种基于TTC染色法的高活力酵母细胞定量筛选方法，将待检测酵母细胞菌液涂布于平板，培养待其长出单菌落；然后接种于96孔细胞培养板各孔培养液中，培养至测定得到菌体OD值在1-3之间，离心弃上清；在96孔细胞培养板各孔中加入TTF萃取剂，震荡10-15S后离心；将震荡离心后的上清液吸取到96孔酶标板中，利用酶标仪在486nm波长下测定TTF吸收值，根据TTF标准曲线及测定的细胞OD值，计算每个孔中TTF含量，以此确定细胞活力大小。本方法筛选结果定量可靠地直接反应细胞活力，不仅能明显降低筛选时间，而且能降低操作过程中的视觉判断产生的人为错误。

公开(公告)号：CN103215301A

公开(公告)日：2013-07-24

申请号：CN201310034108.8

申请日：2013-01-29

Applicant: 南京工业大学

Inventor： 陈怡露 ,  郑涛 ,  冯娇 ,  雍晓雨 ,  许琳 ,  曹琳 ,  沈海波 ,  费文斌

IPC: C12N15/78 ,  C12N1/21 ,  H01M4/90 ,  C12R1/385

Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，涉及微生物燃料电池产电基因工程菌的构建、菌株及其应用。通过分子生物学手段在铜绿假单胞菌PAO1中异源表达大肠杆菌中NAD+从头合成途径与回补途径中共同的关键基因nadE，获得产电量高的基因工程菌株铜绿假单胞菌（Pseudomonasaeruginosa）PA-nadE，应用于微生物燃料电池领域的发展，并且为产电铜绿假单胞菌的基因工程研究奠定了良好的基础。