公开(公告)号：CN111912892B

公开(公告)日：2022-03-25

申请号：CN201910375230.9

申请日：2019-05-07

Applicant: 南京大学

Inventor： 龙亿涛 ,  应佚伦 ,  蒋杰 ,  李孟寅 ,  杨洁 ,  于汝佳

IPC: G01N27/48

Abstract: 本发明公开了一种气单胞菌溶素纳米孔通道在生物磷酸化及相关酶分析中的应用。具体为构建气单胞菌溶素纳米孔通道，并在构建的气单胞菌溶素纳米孔通道的两端施加电压，将待测物或待测物相关探针分子加入检测池的一端，在电压的驱动下待测物穿过气单胞菌溶素纳米孔产生阻断电流信号及阻断电流时间，通过对阻断电流信号及阻断电流时间进行比较分析，获得待测分子相应的检测信息。本发明公开了气单胞菌溶素纳米孔通道的新用途，可以将其用于核酸、多肽、蛋白的磷酸化检测分析，不需要DNA马达蛋白，灵敏度高，检测方便，且可进一步实现对激酶、磷酸酶、酶抑制剂等多种酶的活性分析和定量分析，并可实现酶活的实时监测。

公开(公告)号：CN111912892A

公开(公告)日：2020-11-10

申请号：CN201910375230.9

申请日：2019-05-07

Applicant: 南京大学

Inventor： 龙亿涛 ,  应佚伦 ,  蒋杰 ,  李孟寅 ,  杨洁 ,  于汝佳

IPC: G01N27/48

Abstract: 本发明公开了一种气单胞菌溶素纳米孔通道在生物磷酸化及相关酶分析中的应用。具体为构建气单胞菌溶素纳米孔通道，并在构建的气单胞菌溶素纳米孔通道的两端施加电压，将待测物或待测物相关探针分子加入检测池的一端，在电压的驱动下待测物穿过气单胞菌溶素纳米孔产生阻断电流信号及阻断电流时间，通过对阻断电流信号及阻断电流时间进行比较分析，获得待测分子相应的检测信息。本发明公开了气单胞菌溶素纳米孔通道的新用途，可以将其用于核酸、多肽、蛋白的磷酸化检测分析，不需要DNA马达蛋白，灵敏度高，检测方便，且可进一步实现对激酶、磷酸酶、酶抑制剂等多种酶的活性分析和定量分析，并可实现酶活的实时监测。

公开(公告)号：CN118518715A

公开(公告)日：2024-08-20

申请号：CN202310130840.9

申请日：2023-02-17

Applicant: 南京大学

Inventor： 龙亿涛 ,  高妍 ,  李孟寅 ,  蒋杰 ,  应佚伦

IPC: G01N27/00

Abstract: 本发明涉及一种混合物样品中单个样品的定量方法，包括：1)基于纳米孔道定量检测方法分别获取已知浓度的单独A组分的捕获率以及混合物样品中已知浓度的A组分的捕获率；2)对捕获率的获取方式进行校准；3)采用经校准后的获取方式获取混合物样品中A组分在不同浓度下的捕获率，获取混合物样品中A组分的浓度与捕获率的关系；4)获取混合物样品中所有组分的浓度与捕获率的标准曲线；5)基于标准曲线对混合物样品中未知浓度的某个单个样品进行定量。本发明相较于已报道的混合物样品定量方式既排除了一个分子进孔时对其它分子进孔效率的影响，也无需较多的测量时间和目标事件数量来保证方法的准确性。

公开(公告)号：CN117110405A

公开(公告)日：2023-11-24

申请号：CN202310051967.1

申请日：2023-02-02

Applicant: 南京大学

Inventor： 龙亿涛 ,  蒋杰 ,  李孟寅 ,  应佚伦

IPC: G01N27/416 ,  G01N33/487 ,  G01N27/30

Abstract: 本发明提供了一种纳米孔道检测装置，以及使用该装置对生物样品进行检测的方法和用途。所述纳米孔道检测装置包括具有开孔的绝缘体、位于所述开孔中的磷脂膜或聚合物膜、由突变型气单胞菌溶素形成的穿过所述磷脂膜或聚合物膜的纳米孔道、分别位于绝缘体两侧的腔室、腔室中容纳的电解液、以及设置在腔室中的检测器。本申请开发的纳米孔道技术能够实现对一种或多种样品——例如一种或多种血管紧张素多肽——有效地进行定性或快速定量检测，并且在分辨率、灵敏度、捕获效率和基质兼容性等方面实现显著的改进。本申请开发的纳米孔道技术还能实现对一种或多种样品——例如一种或多种血管紧张素多肽———的动态变化进行实时定量监测。