公开(公告)号：CN101904329A

公开(公告)日：2010-12-08

申请号：CN200910032890.3

申请日：2009-06-05

Applicant: 江苏省淡水水产研究所 ,  南京大学

Inventor： 葛家春 ,  丁淑燕 ,  黄亚红 ,  严维辉 ,  潘建林 ,  李跃华 ,  郝忱 ,  赵沐子 ,  许志强

IPC: A01N1/02 ,  A01K61/00

CPC classification number: Y02A40/81

Abstract: 本发明涉及黄颡鱼精子超低温冷冻保存以及复苏方法，选择形态正常、生长良好、无疾病、达到性成熟的亲鱼，对其用30μg/kg LHRH-A2腹腔注射进行诱导增精，36h后，解剖取精巢于4℃冰箱中预冷的干净研钵中剪碎，将其与任氏液按1∶6稀释后，经4℃平衡30min，加入10％甲醇混匀，分装，在液氮面上方6cm处平衡10min，在液氮面上平衡5min后投入液氮中保存。37℃水浴，激活液SM激活，将黄颡鱼卵挤入容器中，按105∶1的精卵数量比例滴加冻精拌匀，再滴加适量激活溶液SM，拌匀，使卵受精。该发明保存的精子质量高，具备授精能力，其在黄颡鱼的种质保存、遗传育种、可持续养殖及病害防治等方面有着重要的理论意义和应用价值。

公开(公告)号：CN100494348C

公开(公告)日：2009-06-03

申请号：CN200710021045.7

申请日：2007-03-23

Applicant: 南京大学

Inventor： 杨柳燕 ,  任倩 ,  张彤晴 ,  潘建林 ,  蒋丽娟 ,  吴光红 ,  宋炜 ,  肖琳 ,  林海 ,  周刚

IPC: C12N1/20 ,  C02F3/34 ,  C02F1/58 ,  A01K63/04

Abstract: 本发明公开了一种泛菌属菌Pantoea sp.M3(CCTCC No.M 207022)。这种细菌具有降解孔雀石绿的能力。取对数期该菌株，按2%～4%的重量百分比浓度添加到浓度为0.5mg/L～5mg/L的灭菌孔雀石绿降解培养液中，降解培养液组成按g/L计为：葡萄糖0.5～1；NaCl 0.01～0.1；MgSO40.01～0.1；NH4NO30.02～0.1；K2HPO40.01～0.1；KH2PO40.01～0.1；酵母膏0.06～0.3；pH值6.0～8.0。20～30℃降解5～10天孔雀石绿，降解效果较好。本发明可有效去除渔业水体中残留的孔雀石绿及其主要代谢产物隐孔雀石绿，对低浓度孔雀石绿渔业水体具有很好的处理效果，该菌株对0.5～2mg/L的孔雀石绿降解率在90%以上。

公开(公告)号：CN101050436A

公开(公告)日：2007-10-10

申请号：CN200710021045.7

申请日：2007-03-23

Applicant: 南京大学

Inventor： 杨柳燕 ,  任倩 ,  张彤晴 ,  潘建林 ,  蒋丽娟 ,  吴光红 ,  宋炜 ,  肖琳 ,  林海 ,  周刚

IPC: C12N1/20 ,  C02F3/34 ,  C02F1/58 ,  A01K63/04

Abstract: 本发明公开了一种泛菌属菌Pantoea sp.M3(CCTCC No.M 207022)。这种细菌具有降解孔雀石绿的能力。取对数期该菌株，按2％～4％的重量百分比浓度添加到浓度为0.5mg/L～5mg/L的灭菌孔雀石绿降解培养液中，降解培养液组成按g/L计为：葡萄糖0.5～1；NaCl 0.01～0.1；MgSO40.01～0.1；NH4NO30.02～0.1；K2HPO40.01～0.1；KH2PO40.01～0.1；酵母膏0.06～0.3；pH值6.0～8.0。20～30℃降解5～10天孔雀石绿，降解效果较好。本发明可有效去除渔业水体中残留的孔雀石绿及其主要代谢产物隐孔雀石绿，对低浓度孔雀石绿渔业水体具有很好的处理效果，该菌株对0.5～2mg/L的孔雀石绿降解率在90％以上。

公开(公告)号：CN101864476B

公开(公告)日：2012-07-04

申请号：CN200910030771.4

申请日：2009-04-15

Applicant: 江苏省淡水水产研究所 ,  南京大学

Inventor： 葛家春 ,  黄亚红 ,  窦红霞 ,  许志强 ,  丁淑燕 ,  潘建林

IPC: C12Q1/68

Abstract: 本发明公开了一种特异性鉴别刀鲚与凤鲚的PCR技术。根据刀鲚与凤鲚线粒体DNA控制区(D-loop)和细胞色素b(Cytochrome b)基因的保守序列，设计出两对特异引物，制定了便捷的鉴别刀鲚与凤鲚的PCR反应体系。提取鱼肌肉DNA进行PCR扩增，取扩增产物进行1％琼脂糖凝胶电泳，紫外灯下检测，如P1F/R引物对扩增产物存在1220bp DNA条带，P2F/R引物对无扩增，则确定所检鲚鱼为刀鲚；如P1F/R引物对无扩增，P2F/R引物对产物存在280bp DNA条带，则可确定为凤鲚。本方法为形态学上无法鉴别的不同发育时期刀鲚与凤鲚的定性检测提供了快速、可靠的分子生物学鉴定技术。

公开(公告)号：CN101904330A

公开(公告)日：2010-12-08

申请号：CN200910032891.8

申请日：2009-06-05

Applicant: 江苏省淡水水产研究所 ,  南京大学

Inventor： 丁淑燕 ,  黄亚红 ,  郝忱 ,  严维辉 ,  许志强 ,  葛家春 ,  张明生 ,  李跃华 ,  潘建林

IPC: A01N1/02 ,  A01K61/00

CPC classification number: Y02A40/81

Abstract: 本发明涉及翘嘴鳜精子超低温冷冻保存和复苏方法，选择形态正常、生长良好、无疾病、达到性成熟的亲鱼，对其用3mg/kg PG和200μg/kg LRH-A2腹腔注射进行诱导催熟，24h后轻压鱼腹，获取无血污的精液，将其与D-15稀释液按1∶3稀释，4℃平衡30min后，加入10％DMSO混匀，分装，在液氮面上方6cm处平衡10min，在液氮面上平衡5min后投入液氮中保存。37℃水浴，激活液SM激活，将翘嘴鳜卵挤出置于容器中，按105∶1的精卵数量比滴加入解冻后的精液拌匀，再滴加适量激活溶液SM，拌匀，使卵受精。该发明保存的精子质量高，具备授精能力，其在翘嘴鳜的种质保存、遗传育种、可持续养殖及病害防治等方面有着重要的理论意义和应用价值。

公开(公告)号：CN101864476A

公开(公告)日：2010-10-20

申请号：CN200910030771.4

申请日：2009-04-15

Applicant: 江苏省淡水水产研究所 ,  南京大学

Inventor： 葛家春 ,  黄亚红 ,  窦红霞 ,  许志强 ,  丁淑燕 ,  潘建林

IPC: C12Q1/68

Abstract: 本发明公开了一种特异性鉴别刀鲚与凤鲚的PCR技术。根据刀鲚与凤鲚线粒体DNA控制区(D-loop)和细胞色素b(Cytochrome b)基因的保守序列，设计出两对特异引物，制定了便捷的鉴别刀鲚与凤鲚的PCR反应体系。提取鱼肌肉DNA进行PCR扩增，取扩增产物进行1％琼脂糖凝胶电泳，紫外灯下检测，如P1F/R引物对扩增产物存在1220bp DNA条带，P2F/R引物对无扩增，则确定所检鲚鱼为刀鲚；如P1F/R引物对无扩增，P2F/R引物对产物存在280bp DNA条带，则可确定为凤鲚。本方法为形态学上无法鉴别的不同发育时期刀鲚与凤鲚的定性检测提供了快速、可靠的分子生物学鉴定技术。