公开(公告)号：CN119491016A

公开(公告)日：2025-02-21

申请号：CN202311047464.3

申请日：2023-08-18

Applicant: 南京大学

Inventor： 孙博 ,  李东保 ,  杨文

IPC: C12N15/84 ,  C12N15/113 ,  C12N15/29 ,  C12N15/55 ,  A01H5/00 ,  A01H6/82

Abstract: 本发明公开了一种利用CRISPR/Cas9系统编辑一个番茄基因以增大果实的方法及应用，通过基因编辑创制番茄果实增大的材料方法可用于提高番茄产量的培育中，本发明涉及番茄转基因技术和分子育种领域。首先构建CRISPR/Cas9‑gRNA(pHEE401‑gRNA)载体对番茄中的SlKNUCKLES(SlKNU)(Solyc02g160370)基因进行精准编辑，以Micro‑Tom品种番茄子叶作为外植体，通过农杆菌GV3101介导的方法转化，并使用潮霉素作为抗性筛选获得阳性转基因番茄，然后并对SlKNU基因进行测序和果实表型观察，最终获得不含有Cas9的纯合SlKNU基因编辑株系，即为SlKNU功能完全丧失，果实心皮数明显增多、果实体积明显增大的番茄突变体，从而提高番茄的产量，因此该发明在提高番茄产量的高品质分子育种中具有突出的应用前景和经济价值。